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| 玉米自交系SSR标记技术的优化 | |
| 引用本文： | 姜涛,李凯,才源,刘炜,刘敬泽,王丕武.玉米自交系SSR标记技术的优化[J].吉林农业大学学报,2014(6). |
| 作者姓名： | 姜涛 李凯 才源 刘炜 刘敬泽 王丕武 |
| 作者单位： | 1. 吉林农业大学农学院,长春,130118 2. 东辽县园艺特产中心,东辽,136600 3. 辽源市农业科学院,辽源,136200 |
| 基金项目： | 吉林省主要作物分子标记辅助育种技术平台建设，农业部“948”高效作物分子育种体系核心技术引进 |
| 摘 要： | 选用7个玉米自交系为材料,分别研究了PCR反应体系中Mg2+浓度、d NTPs浓度、Taq DNA聚合酶量、引物浓度、模板DNA量,退火温度,PCR产物变性处理及银染方法对玉米自交系SSR标记结果的影响,优化了玉米自交系SSR标记技术。结果表明:优化后的20μL PCR反应体系为1.5 mmol/L Mg2+、0.05 mmol/L d NTPs、0.5 U Taq DNA聚合酶、0.05μmol/L引物、10倍PCR buffer 2.0μL和80 ng模板DNA,最优退火温度为60℃。PCR产物在95℃条件下变性5 min后上样电泳,电泳结束后胶板用蒸馏水快速漂洗,洗后用0.1%的硝酸银溶液银染8 min,再用蒸馏水洗30 s,最后用3%氢氧化钠与1%甲醛显影。 |
| 关 键 词： | 玉米 自交系 PCR反应条件 退火温度 染色方法 |
Optimization of SSR Marking Technique for Maize Inbred Lines |
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| JIANG Tao,LI Kai,CAI Yuan,LIU Wei,LIU Jingze,WANG Piwu.Optimization of SSR Marking Technique for Maize Inbred Lines[J].Journal of Jilin Agricultural University,2014(6). | |
| Authors: | JIANG Tao LI Kai CAI Yuan LIU Wei LIU Jingze WANG Piwu |
| Abstract: | |
| Keywords: | maize inbred line PCR reaction condition annealing temperature staining method |
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