| 一种快速同步检测小麦黄花叶病毒和中国小麦花叶病毒的方法 |
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| 引用本文： | 缪 倩,季英华,任春梅,魏利辉,周益军,程兆榜.一种快速同步检测小麦黄花叶病毒和中国小麦花叶病毒的方法[J].麦类作物学报,2013,33(3):595-599. |
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| 作者姓名： | 缪 倩 季英华 任春梅 魏利辉 周益军 程兆榜 |
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| 作者单位： | 江苏省农业科学院植物保护研究所,江苏南京,210014 |
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| 基金项目： | 农业部小麦现代化产业体系项目( cytx 03)；国家公益性行业专项（201303021）。 |
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| 摘 要： | 针对小麦黄花叶病毒(WYMV)和中国小麦花叶病毒(CWMV)在症状、传播途径、发生规律等方面高度相似、难以用常规手段鉴定的问题,根据两种病毒基因序列的异同点设计了三条引物CWWY-R2、CW1-F2和WY1-F2,以植物总RNA为模板、CWWY-R2为引物反转录合成cDNA.通过优化建立了一种同步检测两种病毒的反应体系:cDNA1.6 μL,引物(10 μmol·L-1)各0.4 μL,10×PCR Buffer(不合Mg2+)2μL,dNTPs(10 mmol·L-1 each)0.4 μL,Taq DNA聚合酶(5U·μL-1)0.8μL,MgCl2(25 mmol·L-1)0.8μL,ddH2O 13.2 μL,合计20 μL; PCR反应条件:94 ℃预变性5 min,94℃ 50 s,50℃50 s,72℃90 s,共30个循环,72℃延伸10 min.WYMV和CWMV的PCR扩增预期目的片段分别为508和918 bp.利用该方法对江苏高邮、扬州和大丰的样本进行检测,它们分别为WYMV、WYMV、CWMV单一侵染,证明该方法准确性较高,可用于两种病害同步检测.
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| 关 键 词： | 小麦黄花叶病毒 中国小麦花叶病毒 禾谷多粘菌 复合PCR |
A Simplified Method for Quick Detection of Wheat Yellow Mosaic Virus and Chinese Wheat Mosaic Virus |
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| MIAO Qian,JI Ying hu,REN Chun mei,WEI Li hui,ZHOU Yi jun,CHENG Zhao bang.A Simplified Method for Quick Detection of Wheat Yellow Mosaic Virus and Chinese Wheat Mosaic Virus[J].Journal of Triticeae Crops,2013,33(3):595-599. |
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| Authors: | MIAO Qian JI Ying hu REN Chun mei WEI Li hui ZHOU Yi jun CHENG Zhao bang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Wheat yellow mosaic virus Chinese wheat mosaic virus Polymyxa graminis multiplex RT PCR |
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