| 猪圆环病毒2型重组Cap蛋白在昆虫杆状病毒中的表达 |
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| 引用本文： | 刘长明,陆月华,张超范,危艳武,刘焕章,童光志.猪圆环病毒2型重组Cap蛋白在昆虫杆状病毒中的表达[J].中国预防兽医学报,2005,27(6):479-482. |
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| 作者姓名： | 刘长明 陆月华 张超范 危艳武 刘焕章 童光志 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 摘 要： | 猪圆环病毒2型(PCV2)基因组包含2个开放阅读框架(ORFs),其中ORF1编码病毒复制相关蛋白(Rep),ORF2编码病毒衣壳蛋白(Cap).为了在昆虫细胞表达Cap蛋白,本研究采用PCR扩增PCV2-ORF2编码基因,将PCR产物插入到昆虫杆状病毒转移载体上,经酶切反应及DNA序列分析得到验证.重组质粒与昆虫杆状病毒线性基因组混合,转染到昆虫细胞(Sf-21)进行基因重组,经3次病毒蚀斑克隆,获得高效表达Cap蛋白的重组杆状病毒,毒价可达1.28×108pfu/mL.采用SDS-PAGE凝胶电泳分析表明,重组Cap融合蛋白分子量为32.8 ku,占总蛋白含量的17.2%.免疫印迹试验分析表明,重组Cap蛋白与PCV2阳性血清产生特异性反应,证明该重组蛋白具有良好的免疫活性反应.本研究为进一步进行该病毒分子诊断、亚单位疫苗以及分子生物学等研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 重组衣壳蛋白 杆状病毒表达 |
| 文章编号： | 1008-0589(2005)06-0479-04 |
| 收稿时间： | 2004-07-15 |
| 修稿时间： | 2004年7月15日 |
Expression of porcine circovirus type 2 recombinant capsid protein using insect baculovirus |
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| LIU Chang-ming,LU Yue-hua,ZHANG Cao-fan,WEI Yan-wu,LIU Huan-zhang,TONG Guang-zhi.Expression of porcine circovirus type 2 recombinant capsid protein using insect baculovirus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2005,27(6):479-482. |
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| Authors: | LIU Chang-ming LU Yue-hua ZHANG Cao-fan WEI Yan-wu LIU Huan-zhang TONG Guang-zhi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine circovirus type 2 recombinant capsid protein baculovirus expression |
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