|
|||||
|
|
| 牛病毒性腹泻病毒通用型RT-PCR检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 郭春娟,吴星星,王璐,季新成,冉多良,买买提·黑牙斯丁,王克栋,熊浩.牛病毒性腹泻病毒通用型RT-PCR检测方法的建立[J].新疆农业大学学报,2012,35(3):217-221. |
| 作者姓名： | 郭春娟 吴星星 王璐 季新成 冉多良 买买提·黑牙斯丁 王克栋 熊浩 |
| 作者单位： | 1. 新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐830052;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐830063 2. 新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052 3. 新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063 |
| 基金项目： | 新疆维吾尔自治区高技术研究项目 |
| 摘 要： | 为建立一种快速、特异、简便的检测牛病毒粘膜腹泻病病毒Ⅰ、Ⅱ型抗原的通用RT-PCR方法,根据GenBank上已发表的牛病毒性粘膜腹泻病毒(BVDV)Ⅰ、Ⅱ型5’端非编码区保守序列设计合成了两条引物,其中上游引物为兼并引物。应用一步法RT-PCR技术分别对Ⅰ(Oregon C24V)、Ⅱ型(279)标准株进行扩增,将PCR产物胶回收后连与pMD18-T载体,经PCR、酶切鉴定条带均正确(288bp),测序结果与预期一致。同时设牛疱疹病毒Ⅰ型、牛传染性鼻气管炎、猪瘟病毒、蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、MDBK细胞作对照,结果均为阴性;并对新疆各地州的样品进行检测。优化反应条件后,检测其灵敏度为10-1 TCID50/mL。经对400份临床样品检测,阳性检出率为10.75%,明显高于ELISA检测。试验表明,该方法具有特异、灵敏、高效、快速、重复性好等特点,可用于牛病毒粘膜腹泻病的临床检测及流行病学检测。 |
| 关 键 词： | 牛黏膜腹泻病毒 5’-UTR 一步法RT-PCR 检测 |
Establishment of Universal RT-PCR for Bovine Virus Diarrhea |
|
| GUO Chun-juan , WU Xing-xing , WANG Lu , JI Xin-cheng , RAN Duo-liang , Maimaiti Heiyasiding , WANG Ke-dong , XIONG Hao.Establishment of Universal RT-PCR for Bovine Virus Diarrhea[J].Journal of Xinjiang Agricultural University,2012,35(3):217-221. | |
| Authors: | GUO Chun-juan WU Xing-xing WANG Lu JI Xin-cheng RAN Duo-liang Maimaiti Heiyasiding WANG Ke-dong XIONG Hao |
| Institution: | 1 (1.College of Animal Medicine,Xinjiang Agricultural University,Urumqi 830052,China;2.Xinjiang Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Urumqi 830063,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |