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猪圆环病毒Ⅰ型ORF1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
引用本文:马红艳,蒋智勇,孙丽华,郝永清,宋长绪.猪圆环病毒Ⅰ型ORF1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].中国兽医科技,2007,37(8):666-669.
作者姓名:马红艳  蒋智勇  孙丽华  郝永清  宋长绪
作者单位:[1]内蒙古农业大学动物科学与医学学院,内蒙古呼和浩特010018 [2]广东省农业科学院兽医研究所,广东广州510640
基金项目:国家食品安全重大专项(2001BA804A31);广东省农业科技攻关项目基金项目(04002083,031990);广东省自然基金重点项目(06105311)(2003821404,20052490100);广东省自然.
摘    要:根据GenBank中猪圆环病毒Ⅰ型(PCV1)ORF1基因序列,设计合成了1对引物,对PCV1 ORF1基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF1基因(939 bp)克隆入pMD18-T载体,将筛选获得的重组质粒命名为pMD-ORF1。测序分析表明,克隆的ORF1与广东分离株DQ659154的核苷酸序列同源性高达99.6%,推导的氨基酸序列同源性为99.4%。将ORF1双酶切产物插入原核表达载体pET-41a,得到的重组子命名为pET-ORF1。用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blot分析,结果表明,PCV1ORF1在pET-41a中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子质量约为67.6 ku。

关 键 词:PCV1ORF1  克隆  表达
文章编号:1673-4696(2007)08-0666-04
收稿时间:2007-01-26
修稿时间:2007-07-17

Cloning of ORF1 gene of porcine circovirus type 1 and its expression in Escherichia coli
MA Hong-yan ,JIANG Zhi-yong , SUN Li-hua , HAO Yong-qing ,SONG Chang-xu.Cloning of ORF1 gene of porcine circovirus type 1 and its expression in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2007,37(8):666-669.
Authors:MA Hong-yan  JIANG Zhi-yong  SUN Li-hua  HAO Yong-qing  SONG Chang-xu
Abstract:
Keywords:PCV1 ORF1  cloning  expression
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