| 分级提取蛋白技术在蛋白质组学中的应用 |
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| 引用本文： | 王维君.分级提取蛋白技术在蛋白质组学中的应用[J].农产品加工．学刊,2011(8):44-48. |
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| 作者姓名： | 王维君 |
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| 作者单位： | 天津市食品加工工程中心天津科技大学,天津,300457 |
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| 摘 要： | 以小鼠急性肝脏氧化损伤为模型,通过采用不同浓度的丙酮对小鼠肝脏蛋白进行分级提取和沉淀,用SDS-聚丙烯酰胺连续密度梯度凝胶电泳(SDS-PAGE)试验寻找差异表达蛋白质。通过试验发现,模型组中水溶性总蛋白、非水溶性总蛋白和膜蛋白总体表达量较空白组均有明显降低,进而对水溶性总蛋白进行的分级提取试验中发现有2个蛋白条带具有显著的差异性。进一步以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测差异蛋白的肽质量指纹,在蛋白质数据库中检索鉴定差异蛋白的种类,经鉴定两种差异蛋白分别为一种未命名蛋白和Cu/Zn超氧化物歧化酶(Cu/Zn superoxide dismutase),为进一步研究其损伤机理奠定基础。通过分级提取蛋白质样品的试验方法,降低了蛋白组学当中蛋白质分离的成本和技术难度,在保证蛋白纯度的同时提高了电泳的分辨率,电泳图中的条带清晰、分明,便于后期进行质谱分析,同时也为蛋白质组学的应用提供了一种新思路和新方法。
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| 关 键 词： | 蛋白质组学 蛋白质提取 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 |
Application of Sequential Extraction Protein Technology on Proteomics |
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| Wang Weijun.Application of Sequential Extraction Protein Technology on Proteomics[J].Nongchanpin Jlagong.Xuekan,2011(8):44-48. |
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| Authors: | Wang Weijun |
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| Institution: | Wang Weijun(Food Processing Engineering Center of Tianjin,Tianjin University of Science and Technology,Tianjin 300457,China) |
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| Abstract: | This paper is modeled by acute oxidative injury in liver of mice.The protein is sequentially extracted by acetone of different concentrations,the differences on expression being is found out by SDS-PAGE grads electrophoresis experiment,which show the expression of water-soluble protein(WSP),water-insoluble protein and membrane protein in model group(the mice are injected with alloxan)decreased heavily,much lower than control group.Then during the sequential extraction from WSP,highly significant differences... |
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| Keywords: | proteomics protein extraction SDS-PAGE |
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