猪瘟病毒E2亚单位蛋白与集落刺激因子的融合表达及其免疫效果分析 |
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引用本文: | 倪莅文,刘珂,夏叶,罗丽双,刘晓东,桂红兵,庞然,周斌,陈溥言.猪瘟病毒E2亚单位蛋白与集落刺激因子的融合表达及其免疫效果分析[J].畜牧与兽医,2009,41(10). |
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作者姓名: | 倪莅文 刘珂 夏叶 罗丽双 刘晓东 桂红兵 庞然 周斌 陈溥言 |
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作者单位: | 南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095 |
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基金项目: | 南京农业大学青年科技创新基金,南京农业大学SRT计划项目 |
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摘 要: | 优化了工程菌BL21-E2 A/D-GM-CSF(含有783 bp的E2 A/D-GM-CSF融合基因)的原核表达条件,结果表明诱导的最佳时间和诱导剂IPTG的最佳用量分别为4 h和0.8 mmol/L。在此基础上,大量诱导表达融合蛋白后经Ni-IDA蛋白质层析柱纯化,Western-blot鉴定纯化蛋白具有抗原活性。将融合蛋白与福氏佐剂制成亚单位疫苗后免疫试验小鼠,并与E2 A/D蛋白、猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)进行免疫效果比较,结果显示E2 A/D-GM-CSF亚单位疫苗免疫小鼠后能够产生抗猪瘟抗体,并且抗体水平明显高于E2-A/D免疫组和HCLV免疫组。研究表明GM-CSF经融合表达后对E2-A/D蛋白有显著的免疫增强作用。
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关 键 词: | 猪瘟病毒 E2基因 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 原核表达 免疫增强 |
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