中华绒螯蟹微卫星单片引物扩增产物的初步分析 |
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引用本文: | 张菁,陆仁后,等.中华绒螯蟹微卫星单片引物扩增产物的初步分析[J].中国水产科学,2002,9(1):5-9. |
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作者姓名: | 张菁 陆仁后 |
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作者单位: | 张菁(中国科学院,水生生物研究所,湖北,武汉,430072)
陆仁后(中国科学院,水生生物研究所,湖北,武汉,430072)
邱涛(中国科学院,水生生物研究所,湖北,武汉,430072) |
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基金项目: | 国家"九五"攻关项目资助(96-008-01-03-05). |
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摘 要: | 采用人工合成的6个串联重复寡聚核苷酸单引物,以及2个加锚的二核苷酸引物,利用SPAR和ASSR技术,对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)基因进行PCR扩增,结果发现,对于GC含量丰富的三、四核苷酸引物如(GGA)5、(GACA)4,在不同退火温度的PCR反应中,都能扩增出清晰的条带,可以作为PCR扩增引物;反之,GC含量<50%的(CATA)4和(GATA)4很难检测到扩增产物,在基本PCR条件下,2个加锚的二核苷酸引物如(AC)8、(GA)8,无论怎样改变退火温度,终难形成清晰条带,将不同引物扩增产物克隆到T-Vector上,选取其中9个阳性克隆进行序列测定,发现在(GACA)4引物扩增的2个片段中,序列结构相似,除引物序列外,都出现了2-3个内部重复序列和高含量的AT,其余7个片段在引物序列间都未见内部重复序列。
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关 键 词: | 中华绒螯蟹 微卫星 单引物扩增产物 SPAR ASSR 基因 核苷酸 |
文章编号: | 1005-8737(2002)01-0005-05 |
修稿时间: | 2001年4月4日 |
Amplification products by singly microsatellite-primed PCR in Eriocheir sinensis |
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Abstract: | |
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