| A群猪轮状病毒G5型OSU株VP7基因的克隆及其重组杆状病毒的鉴定 |
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| 引用本文： | 徐宏军,师东方,等.A群猪轮状病毒G5型OSU株VP7基因的克隆及其重组杆状病毒的鉴定[J].中国兽医科技,2002,32(6):18-20. |
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| 作者姓名： | 徐宏军 师东方 |
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| 摘 要： | 利用反转录－聚合酶链反应（RT－PCR）扩增出A群猪轮状病毒（PRV）G5型OSU株长度约为1．0kb的基因片段，将其克隆到pMD18-T载体上进行测序鉴定，证明为该PRV的VP7蛋白基因，与已发表的该PRV，VP7基因序列的同源性为99．8％，将该基因黏端克隆至表达载体PblusBAChis C质粒中，酶切及PCR鉴定表明获得了PRV－VP7蛋白基因与PblueBAChisC质粒的阳性重组子，纯化该重组质粒并与线性杆状病毒DNA分子Bac-N-Blue共转染昆虫细胞sf9,5d后收获重组病毒，通过对重组杆状病毒DNA分子的酶切及PCR鉴定，确定PRV－VP7基因已正确投入，将经3次蚀斑筛选纯化后的该重组杆状病毒接种于sf9细胞大量增殖后，获得了重组杆状病毒PRV－VP7蛋白的真核表达。
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| 关 键 词： | 猪轮状病毒 VP7基因 克隆 重组杆状病毒 |
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