| 圆弧青霉菌毒素-青霉酸间接竞争ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 郭成志,朱丽,鲁银,袁慧.圆弧青霉菌毒素-青霉酸间接竞争ELISA检测方法的建立[J].畜牧与兽医,2010,42(8). |
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| 作者姓名： | 郭成志 朱丽 鲁银 袁慧 |
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| 作者单位： | 湖南农业大学动物医学院,湖南,长沙,410128 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 对圆弧青霉菌毒素-青霉酸的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测条件进行优化,建立最佳反应条件下的间接竞争酶联免疫吸附试验。以间接非竞争ELISA基本操作步骤为基础,优化ELISA反应过程中的反应条件,最后建立青霉酸的间接竞争ELISA检测法。经在均一性良好酶标板测试,抗体最适工作浓度为1∶4×103,人工抗原的饱和浓度为3.35μg/mL。试验结果显示,37℃包被2 h,用0.2 g/L BSA封闭液封闭1 h可达到良好的封闭效果;底物的最适反应时间为10 min;以板外竞争反应模式为佳。试验初步建立了青霉酸间接竞争酶联免疫吸附法,为将来ELISA试剂盒的研制奠定基础。
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| 关 键 词： | 圆弧青霉菌 青霉酸 酶联免疫吸附试验(ELISA) 检测条件 优化 |
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