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苹果壳色单隔孢溃疡病菌TaqMan实时荧光PCR检测方法
引用本文:林惠娇,牟桂萍,滕少娜,张海鹏,周而勋.苹果壳色单隔孢溃疡病菌TaqMan实时荧光PCR检测方法[J].华南农业大学学报,2021,42(2):65-70.
作者姓名:林惠娇  牟桂萍  滕少娜  张海鹏  周而勋
作者单位:华南农业大学植物保护学院/广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室/农业部华南作物有害生物综合治理重点实验室,广东广州510642;黄埔海关,广东广州510730;黄埔海关,广东广州510730;重庆海关,重庆401147;华南农业大学植物保护学院/广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室/农业部华南作物有害生物综合治理重点实验室,广东广州510642
基金项目:农业部华南作物有害生物综合治理重点实验室开放基金(SCIPM2018-06)
摘    要:目的 针对我国检疫性植物病原真菌苹果壳色单隔孢溃疡病菌Botryosphaeria stevensii,建立实时荧光PCR检测方法。方法 根据苹果壳色单隔孢溃疡病菌及其近似种的β微管蛋白基因(β-tubulin基因)保守序列设计1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针,分别以病菌DNA和β-tubulin基因靶标序列重组质粒DNA为阳性标准品检验探针的特异性和灵敏度。结果 探针BsP267对苹果壳色单隔孢溃疡病菌菌株表现出特异性阳性扩增,且与近缘种及其他常见的果腐病菌无交叉反应,扩增效率为105.858%,探针检测DNA的灵敏度达到1 fg/μL。结论 本研究建立的苹果壳色单隔孢溃疡病菌实时荧光PCR检测法具有高特异性和灵敏度,可用于该病害的防控检测和检疫工作。

关 键 词:苹果壳色单隔孢溃疡病菌  实时荧光PCR  TaqMan探针  快速检测  β微管蛋白基因
收稿时间:2020/4/28 0:00:00

A real-time fluorescent PCR method for detection of Botryosphaeria stevensii from apple using TaqMan probe
LIN Huijiao,MOU Guiping,TENG Shaon,ZHANG Haipeng,ZHOU Erxun.A real-time fluorescent PCR method for detection of Botryosphaeria stevensii from apple using TaqMan probe[J].Journal of South China Agricultural University,2021,42(2):65-70.
Authors:LIN Huijiao  MOU Guiping  TENG Shaon  ZHANG Haipeng  ZHOU Erxun
Institution:College of Plant Protection, South China Agricultural University/Guangdong Provincial Key Laboratory of Microbial Signals and Disease Control/The Key Laboratory of Integrated Pest Management on Crops in South China, Ministry of Agriculture, Guangzhou 510642, China;Huangpu Customs, Guangzhou 510730, China;Chongqing Customs, Chongqing 401147, China
Abstract:
Keywords:
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