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秦烟遗传转化体系的优化
引用本文:孔 娜,朱锦辉,陈耀峰.秦烟遗传转化体系的优化[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2008,36(9):71-75.
作者姓名:孔 娜  朱锦辉  陈耀峰
作者单位:西北农林科技大学农学院,陕西,杨凌,712100
摘    要:【目的】优化烟草的高效遗传转化体系。【方法】以陕西地区广泛种植的烟草品种秦烟98为试材,采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,LBA4404)介导法,将从酿酒酵母细胞中克隆到的具有较强耐盐表型的HAL1基因进行遗传转化,对农杆菌介导的遗传转化条件及其影响因素进行研究。【结果】用50 mg/L卡那霉素(Kan)筛选转化外植体用800 mg/L羧苄青霉素(Cb)除菌可以获得理想的筛选和除菌效果。以优化的农杆菌介导烟草叶片的遗传转化条件为:将未经过预培养(预培养0 d)的外植体用稀释150倍的农杆菌菌液(OD600=0.5)浸泡1min,转至MS1培养基上共培养48 h,用无菌水冲洗后于体积分数2%NaClO中浸泡15 min,用无菌水冲洗4~5次,置800 mg/L Cb+质量分数0.1%的甘露醇中浸泡约12 h除菌。【结论】获得了农杆菌介导烟草叶片遗传转化的最佳优化条件,有效地减少了外植体的污染率,提高了抗性芽分化率。

关 键 词:烟草  HAL1基因  根癌农杆菌介导法  秦烟98
收稿时间:9/4/2007 12:00:00 AM

Study on optimization of transformation system for the Qin tobacco
KONG Na,ZHU Jin-hui,CHEN Yao-feng,REN Hui-li,GUO Dong-wei.Study on optimization of transformation system for the Qin tobacco[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2008,36(9):71-75.
Authors:KONG Na  ZHU Jin-hui  CHEN Yao-feng  REN Hui-li  GUO Dong-wei
Institution:(College of Agriculture,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:
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