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策勒黑羊ERα基因克隆、生物信息学分析及卵巢组织表达研究
引用本文:张继虎,米热妮萨,王子渲,李琳,邢凤,刘书东.策勒黑羊ERα基因克隆、生物信息学分析及卵巢组织表达研究[J].中国畜牧兽医,2022,49(5):1679-1687.
作者姓名:张继虎  米热妮萨  王子渲  李琳  邢凤  刘书东
作者单位:1. 塔里木大学动物科学与技术学院, 阿拉尔 843300;2. 新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室, 阿拉尔 843300;3. 青岛农业大学动物科技学院, 青岛 266109
基金项目:南疆策勒黑羊多胎性状QTLs的遗传解析(32060743);塔里木大学校长基金项目(TDZKBS201903;19/1119263)
摘    要:【目的】 克隆策勒黑羊雌激素受体α(estrogen receptor α,ERα)序列并进行生物信息学分析,同时测定策勒黑羊卵巢中ERα基因的表达情况。【方法】 利用RT-PCR和TA克隆方法获得策勒黑羊ERα基因序列,并采用在线软件对其进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR方法检测ERα基因在策勒黑羊卵泡期、黄体期和妊娠30 d母羊卵巢中的表达情况。【结果】 成功克隆获得策勒黑羊ERα基因序列,长1 791 bp,编码596个氨基酸,与山羊和牛的相似性最高。生物信息学分析显示,ERα蛋白分子式为C2930H4600N822O862S41,理论等电点(pI)为7.32,不稳定指数为50.33,为不稳定亲水性蛋白;存在28个O-糖基化位点和54个磷酸化位点,不存在N-糖基化位点;主要定位在细胞核中,不具备跨膜结构;二级结构主要为α-螺旋及无规则卷曲。实时荧光定量PCR检测显示,ERα基因在策勒黑羊卵泡期、黄体期和妊娠30 d的卵巢中均有表达,与卵泡期相比,黄体期ERα基因表达量极显著下降(P<0.01),妊娠30 d ERα基因表达量极显著升高(P<0.01)。【结论】 策勒黑羊ERα基因序列长1 791 bp,编码596个氨基酸,为亲水蛋白,二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。ERα基因在策勒黑羊卵泡期、黄体期和妊娠30 d的卵巢中均有表达。本研究结果为进一步探究ERα基因在策勒黑羊卵巢卵泡发育、黄体形成和妊娠中发挥的作用提供参考。

关 键 词:策勒黑羊  ERα基因  克隆  表达  
收稿时间:2021-11-04
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