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MID2对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的调控作用
引用本文:周立坤,董鑫媛,李家辉,崔志莹,赵士杰,徐婕,陈静,张宜娜,夏平安.MID2对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的调控作用[J].畜牧兽医学报,2023(11):4735-4744.
作者姓名:周立坤  董鑫媛  李家辉  崔志莹  赵士杰  徐婕  陈静  张宜娜  夏平安
作者单位:1. 河南农业大学生命科学学院;2. 河南农业大学动物医学院
摘    要:本试验旨在研究MID2(midline 2)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)复制的调控作用。首先用PRRSV BJ-4毒株感染MARC-145细胞,通过RT-qPCR和Western blot技术分别检测MID2的mRNA转录水平和蛋白表达水平,发现PRRSV感染能够上调MID2的表达。为了进一步探究MID2对PRRSV复制的影响,本研究过表达或沉默MID2表达,再接种PRRSV,通过RT-qPCR和Western blot技术,检测PRRSV ORF7的转录水平及N蛋白的表达水平,结果显示MID2能够抑制PRRSV复制。随后将pCMV-Flag-MID2和pGL3-IFN-β-Luc真核表达质粒共转染到HEK293T细胞中,通过双荧光素酶报告基因试验检测IFN-β的启动子活性,结果表明MID2能够正调控I-IFN信号通路。最后将MID2与RIG-I的真核表达质粒共转染到HEK293T细胞中,通过Co-IP试验发现MID2和RIG-I存在相互作用,且MID2能够以剂量依赖的方...

关 键 词:MID2  猪繁殖与呼吸综合征病毒  I-IFN  RIG-I
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