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山羊FATP2基因的克隆及对前体脂肪细胞脂质沉积的影响
引用本文:唐崟梅,李琪,李海洋,林亚秋,王永,向华,黄炼,朱江江.山羊FATP2基因的克隆及对前体脂肪细胞脂质沉积的影响[J].畜牧兽医学报,2023(9):3642-3652.
作者姓名:唐崟梅  李琪  李海洋  林亚秋  王永  向华  黄炼  朱江江
作者单位:1. 西南民族大学青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省/教育部重点实验室;2. 西南民族大学青藏高原研究院
摘    要:旨在对山羊脂肪酸转运蛋白2(fatty acid transport protein 2,FATP2)基因进行克隆及生物信息学分析,检测FATP2基因在山羊不同组织中的表达差异,并进一步揭示干扰FATP2基因对山羊肌内前体脂肪细胞脂质代谢的影响。本试验以10月龄健康简州大耳羊(n=12)为试验动物。采用RT-PCR法扩增并克隆山羊FATP2基因,进行序列对比、系统发育树构建及生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR检测FATP2基因在山羊不同组织中及在山羊肌内前体脂肪细胞不同分化时期的相对表达水平,合成SI-RNA干扰序列并转染至山羊肌内前体脂肪细胞;使用RT-qPCR检测FATP2干扰效率及脂质代谢相关基因的表达情况;通过Bodipy染色法观察干扰FATP2对脂滴形成的影响,利用GPO-Trinder酶学反应检测甘油三酯含量。结果显示,获得山羊FATP2基因序列全长2 335 bp, CDS区1 863 bp, 5′UTR 188 bp, 3′UTR 284 bp;共编码621个氨基酸,山羊FATP2基因在肝脏表达量最高;RT-qPCR检测结果显示,FATP2表达在细胞中被显著干扰;B...

关 键 词:山羊  FATP2基因  RNA干扰  肌内前体脂肪细胞
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