| 基于绵羊角质形成细胞探究SHH通过Krox20调节IGFBP5的表达影响羊毛弯曲 |
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| 引用本文： | 董亚洁,郝晓静,吴晋强,王荣,张鹏翔,王海东,赫晓燕.基于绵羊角质形成细胞探究SHH通过Krox20调节IGFBP5的表达影响羊毛弯曲[J].畜牧兽医学报,2023(6):2365-2375. |
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| 作者姓名： | 董亚洁 郝晓静 吴晋强 王荣 张鹏翔 王海东 赫晓燕 |
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| 作者单位： | 山西农业大学动物医学学院 |
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| 基金项目： | 山西省自然科学基金(201701D121106)； |
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| 摘 要： | 本研究旨在探究音猬因子(Sonic hedgehog, SHH)与羊毛弯曲形成的关系及其调控机制。本研究通过培养原代绵羊角质形成细胞，构建过表达和沉默载体，利用细胞转染、免疫共沉淀、实时荧光定量PCR和Western blot等方法探究SHH与羊毛弯曲的关系，分析SHH是否通过早期生长应答基因2(early growth response 2, EGR2/Krox20)调控胰岛素样生长因子结合蛋白5(insulin-like growth factor binding proteins 5, IGFBP5)来影响羊毛弯曲。结果显示，体外成功分离培养绵羊原代角质形成细胞，显微镜下呈“铺路石”样，免疫荧光鉴定结果呈阳性表达，CCK-8结果表明细胞生长曲线呈“S”型，符合细胞增殖趋势；过表达和沉默SHH后，羊毛弯曲相关基因KRT71、β-catenin和TCHH的表达量显著升高和降低；过表达Krox20后，羊毛弯曲相关基因的表达量显著升高；免疫共沉淀试验表明，在绵羊角质形成细胞中SHH可以与Krox20相互作用且正调控Krox20;实时荧光定量PCR和Western blot结果显示，过表达...
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| 关 键 词： | SHH 羊毛弯曲 绵羊角质形成细胞 Krox20 IGFBP5 |
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