| 牛支原体0580基因C端截短体的原核表达及生物学功能初步分析 |
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| 引用本文： | 荆婷婷,尹号,黄蓉,兰仕梅,李章程,尤留超,郝华芳,付磊,储岳峰.牛支原体0580基因C端截短体的原核表达及生物学功能初步分析[J].畜牧兽医学报,2023(7):2991-3001. |
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| 作者姓名： | 荆婷婷 尹号 黄蓉 兰仕梅 李章程 尤留超 郝华芳 付磊 储岳峰 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室 |
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| 基金项目： | 甘肃省科技重大专项(22ZD6NA001)； |
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| 摘 要： | 旨在初步分析牛支原体(Mycoplasma bovis)PG45菌株0580基因的生物学功能。前期测试发现牛支原体PG45菌株、08M菌株、07801菌株都有溶解鼠红细胞的现象，根据NCBI中对PG45菌株的基因注释，筛选到1个假定与溶血素相关的基因MBOVPG45＿0580。该基因编码的蛋白经预测具有4个跨膜区，全长表达困难，故构建了不含跨膜区的C端截短体原核表达载体Pcold III-0580-C,进行诱导表达以及纯化，并在小鼠中制备0580-C端重组蛋白的多克隆抗体，对0580-C重组蛋白溶红细胞能力、多克隆抗体效价及特异性、是否影响菌株黏附细胞的能力进行了探究。PG45菌株中假定的与溶血素相关的蛋白0580在牛支原体中的相似性高达100%,去除4个跨膜区的重组蛋白0580-C能在大肠杆菌中表达，相对分子质量约为37 ku;鼠红细胞溶血试验发现0580-C重组蛋白没有溶血活性，但黏附及黏附阻断试验发现该蛋白有助于提高牛支原体黏附EBL细胞的效率，0580-C蛋白鼠源多抗能有效阻断牛支原体对EBL细胞的黏附。制备的0580-C蛋白鼠源多克隆抗体效价达211,且...
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| 关 键 词： | 牛支原体 原核表达 黏附作用 0580-C重组蛋白 |
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