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猪囊胚体外持续发育培养体系主要影响因素的研究
引用本文:刘东松,柴壮,齐子成,刘佳慧,金君学,刘忠华.猪囊胚体外持续发育培养体系主要影响因素的研究[J].中国畜牧杂志,2023(3):189-195.
作者姓名:刘东松  柴壮  齐子成  刘佳慧  金君学  刘忠华
作者单位:东北农业大学黑龙江省动物细胞与遗传工程重点实验室
基金项目:国家自然科学基金(31872360);;十三五国家重点研发项目(2016YFA0100200);
摘    要:本研究旨在探索猪囊胚体外持续发育的关键影响因素,为构建支持猪胚胎体外发育至三胚层分化阶段的培养体系奠定基础。采用孤雌激活后6 d的猪囊胚进行体外持续培养,通过检测分析发育至8 d的猪孤雌囊胚的形态学特征和基因表达情况,系统评价PZM-3、Advanced DMEM/F12和KnockOutTMDMEM/F12基础培养体系,以及胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)、血清替代物(Knockout Serum Replacement,KSR)、L-谷氨酰胺(L-Glutamine)和胰岛素-转铁蛋白-硒-氨基乙醇(Insulin-Transferrin-Selenium-X,ITS-X)等成份对猪囊胚体外持续发育的作用,建立猪囊胚体外持续发育培养体系;通过TUNEL和免疫荧光方法检测该体系对猪囊胚的影响。结果表明:AKGI(Advanced DMEM/F12组合添加5%KSR、4 mmol/L L-Glutamine和1×ITS-X)为猪囊胚体外持续发育最适培养体系,可增加囊胚直径和囊胚细胞数(P<0.05),降低凋亡细胞比例(P<0.01),增加内细胞团(I...

关 键 词:  囊胚  持续发育  体外培养
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