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黄鳍鲷肌肉中弹性蛋白酶基因全长克隆及生物信息学
引用本文:钟婵,吴国平,舒梅,孙乐常,曹敏杰.黄鳍鲷肌肉中弹性蛋白酶基因全长克隆及生物信息学[J].水产学报,2021,45(1):125-135.
作者姓名:钟婵  吴国平  舒梅  孙乐常  曹敏杰
作者单位:江西农业大学,江西农业大学,江西农业大学,集美大学,集美大学
基金项目:国家自然科学基金(31701676,31760483);江西省自然科学基金(20192BAB214026);江西省教育厅科技计划重点项目(GJJ180173)
摘    要:研究表明弹性蛋白酶(elastase, Ela)参与调控嗜水气单胞菌引起的细菌性溃疡病,对控制鱼类养殖中免疫疾病有重要作用。本研究根据已报道脊椎动物的Elas基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR和RACE技术克隆获得黄鳍鲷Ela基因(AlEla)cDNA序列全长,并对其进行生物信息学分析。结果显示,AlEla基因全长为946 bp,包含807 bp的开放阅读框,编码269个氨基酸,含有16个氨基酸信号肽的亲水性稳定膜外蛋白,定位于细胞外基质,具有3个O-糖基化和15个磷酸化的潜在位点。编码的成熟AlEla蛋白预测相对分子质量27 509 u,等电点为6.05。氨基酸序列同源性比对发现,AlEla与鲷和鲆的Elas2的同源性为84.76%~99.26%,处于系统进化树上同一分支,表明它们的亲缘性相近。AlEla具有Elas的保守结构,如Tryp-SPc结构域、丝氨酸蛋白酶催化三联体、保守的半胱氨酸残基以及在C端含有GDSGGPL序列等,揭示该酶有丝氨酸蛋白酶的催化活性。对AlEla蛋白的二级结构分析显示,α-螺旋、β-转角、β-折叠和无规则卷曲所占的比例分别为17.84%、7.06%、24.54%和50.56%。三级结构分析推测α-螺旋和β-折叠对于AlEla蛋白的空间构象可能有着重要作用。本研究从黄鳍鲷肌肉中成功克隆AlEla基因并分析其生物信息学特征,为后续研究AlEla参与调控鱼类免疫疾病的机制提供理论基础。

关 键 词:黄鳍鲷  弹性蛋白酶  基因克隆  生物信息学分析
收稿时间:2019/11/23 0:00:00
修稿时间:2020/6/23 0:00:00

Cloning and bioinformatic analysis of elastase gene from skeletal muscle of yellowfin seabream (Acanthopagrus latus)
ZHONG Chan,WU Guoping,SHU Mei,SUN Lechang,CAO Minjie.Cloning and bioinformatic analysis of elastase gene from skeletal muscle of yellowfin seabream (Acanthopagrus latus)[J].Journal of Fisheries of China,2021,45(1):125-135.
Authors:ZHONG Chan  WU Guoping  SHU Mei  SUN Lechang  CAO Minjie
Institution:Jiangxi Agricultural University,Jiangxi Agricultural University,Jiangxi Agricultural University,Jimei University,Jimei University
Abstract:
Keywords:Acanthopagrus latus  elastase  gene cloning  bioinformatic analysis
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