| 黑琴鸡SSR-PCR反应体系的建立及优化 |
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| 引用本文： | 高立杰,曹栋,侯建华,陈成,杜梦婷,祃来昆.黑琴鸡SSR-PCR反应体系的建立及优化[J].黑龙江畜牧兽医,2013(9):44-46. |
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| 作者姓名： | 高立杰 曹栋 侯建华 陈成 杜梦婷 祃来昆 |
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| 作者单位： | 河北农业大学动物科技学院 |
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| 基金项目： | 河北省自然科学基金项目(C2009000614) |
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| 摘 要： | 为了优化黑琴鸡简单重复序列(SSR)-PCR反应体系,试验以黑琴鸡基因组DNA为模板,采用L25(54)正交试验设计,对SSR反应体系中的4种关键因素(Taq DNA聚合酶、dNTP、引物、DNA模板)进行优化。结果表明:各因素水平变化对PCR反应影响的显著性依次为引物、Taq DNA聚合酶、dNTP、DNA模板,试验建立的黑琴鸡SSR-PCR最佳反应体系(20μL)为1 U Taq DNA聚合酶0.5μL,1.6 mmol/L dNTP 2μL,1.8μmol/L引物2μL,DNA模板40 ng,10×Buffer 2μL,加双蒸水至总体积为20μL。
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| 关 键 词： | 黑琴鸡 简单重复序列(SSR)-PCR 正交设计 体系优化 |
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