| 大鲵虹彩病毒的分离纯化及其MCP基因序列分 |
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| 引用本文： | 张星朗,周小愿,张 辉.大鲵虹彩病毒的分离纯化及其MCP基因序列分[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2014,42(12):23-28. |
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| 作者姓名： | 张星朗 周小愿 张 辉 |
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| 作者单位： | 中国水产科学院 黄河水产研究所,中国水产科学院 黄河水产研究所,中国水产科学院 长江水产研究所 |
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| 基金项目： | 陕西省科学技术计划项目(2012K01-18) |
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| 摘 要： | 【目的】确定陕西省略阳县某大鲵养殖场高致死性疾病的病原,分析其主要衣壳蛋白(MCP)的基因特征。【方法】采集患病大鲵,观察其临床症状,取其脏器组织,处理后分别分离细菌和接种鲤鱼上皮瘤(EPC)细胞,观察细胞病变,分离病毒;对病原进行增殖,采用蔗糖密度梯度(20%,30%,40%,50%,60%)离心法进行纯化,电镜观察纯化样品。克隆分离病毒的MCP基因,测定其序列并进行系统进化树分析。【结果】患病大鲵背部有溃疡、头部胀大且有出血点,尾部有轻微的溃烂。取病鲵内脏组织样品分离病原,未分离到细菌;处理的内脏组织感染EPC细胞,出现细胞病变。电镜观察证实,在蔗糖密度梯度为50%~60%的样品中,病毒粒子的纯度最高,且结构较为完整;病毒粒子的直径约150nm,与虹彩病毒相似。MCPPCR扩增得到了预期长度(1 392bp)的特异性产物。NCBI BLAST结果显示,扩增的MCP序列与蛙病毒属的感染性造血器官坏死病毒(EHNV)、食用蛙病毒(RSV)、普通产婆蟾病毒(CMTV)以及梭鲈虹彩病毒(PPIV)的MCP全长的同源性最高,达到99%;与中华鳖虹彩病毒(STIV)、蛙病毒3型(FV3)、虎纹蛙虹彩病毒(RTV)等MCP全长的同源性为98%。系统发育分析结果显示,导致该例大鲵发病的病毒为蛙病毒属的虹彩病毒。【结论】造成陕西省略阳县某大鲵养殖场大鲵大量死亡的病原为蛙病毒属的虹彩病毒,将该株病毒命名为大鲵虹彩病毒略阳分离株(CGSIV-LY1112)。
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| 关 键 词： | 大鲵 虹彩病毒 纯化 MCP 系统进化树 |
| 收稿时间： | 2013/8/19 0:00:00 |
Isolation,purification and major capsid protein gene sequence analysis of Iridovirus isolated from Chinese giant salamander,Andrias davidianus |
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| ZHANG Xing-lang,ZHOU Xiao-yuan and ZHANG Hui.Isolation,purification and major capsid protein gene sequence analysis of Iridovirus isolated from Chinese giant salamander,Andrias davidianus[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2014,42(12):23-28. |
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| Authors: | ZHANG Xing-lang ZHOU Xiao-yuan and ZHANG Hui |
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| Institution: | ZHANG Xing-lang;ZHOU Xiao-yuan;ZHANG Hui;Yellow River Fisheries Institute,CAFS;Yangtze River Fisheries Research Institute,CAFS; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Andrias davidianus Iridovirus purification MCP phylogenetic tree |
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