| 741杨双Bt基因的遗传转化及转基因株系的抗虫性 |
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| 引用本文： | 王桂英,杨敏生,霍雪梅,王艳平,李珊珊.741杨双Bt基因的遗传转化及转基因株系的抗虫性[J].林业科学,2012,48(9):42-49. |
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| 作者姓名： | 王桂英 杨敏生 霍雪梅 王艳平 李珊珊 |
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| 作者单位： | 1. 河北农业大学林学院林业生物实验室 保定071001;廊坊市农林科学院 廊坊065000
2. 河北农业大学林学院林业生物实验室 保定071001 |
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| 基金项目： | 林业公益性行业科研专项经费重大项目，国家高技术研究发展计划"863"计划 |
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| 摘 要： | 以含有Cry3Aa基因的重组质粒pBCC3为基础,利用PCR和DNA重组技术,从pBCC3中克隆出抗虫基因Cry3Aa,将其正向插入载体pCAMBIA1305的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,构建成pCAMBIA1305-Cry3Aa植物表达载体,并导入根癌农杆菌EHA105。采用农杆菌介导的遗传转化法,将Cry3Aa基因转入已转Cry1Ac+API基因的741毛白杨无性系pB29中,获得转双Bt基因的741杨。在含潮霉素的培养基中进行多次继代筛选,获得抗性稳定的无性系9个,编号为pCCA1—pCCA9。采用特异引物分别对转基因植株进行PCR检测,结果显示Cry1Ac基因稳定存在于pB29中,Cry3Aa基因已整合到各无性系的基因组DNA中。ELISA毒蛋白检测,转基因株系都有Cry1Ac和Cry3Aa杀虫蛋白表达。用转基因植株叶片进行柳蓝叶甲(鞘翅目)和美国白蛾(鳞翅目)室内饲虫试验结果表明,转基因植株具有双抗性。根据对测试昆虫的致死率划分高中低3个抗性水平,其中pCCA2,pCCA5,pCCA6,pCCA9具有双高抗;pCCA3,pCCA4和pCCA7对柳蓝叶甲表现出中、低抗性,对美国白蛾则高抗;而pCCA1表现对美国白蛾的极低抗性,对柳蓝叶甲则高抗。
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| 关 键 词： | 载体构建 Cry1Ac基因 Cry3Aa基因 双Bt741杨 抗虫性 |
Transformation of 741 Poplar with Double Bt Genes and the Insect-Resistance of the Transgenic Plant |
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| Wang Guiying
,
Yang Minsheng
,
Huo Xuemei
,
Wang Yanping
,
Li Shanshan.Transformation of 741 Poplar with Double Bt Genes and the Insect-Resistance of the Transgenic Plant[J].Scientia Silvae Sinicae,2012,48(9):42-49. |
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| Authors: | Wang Guiying Yang Minsheng Huo Xuemei Wang Yanping Li Shanshan |
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| Institution: | 1 (1. Agricultural University of Hebei Baoding 071001; 2. Langfang Academy of Agriculture and Forestry Sciences Langfang 065000) |
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| Abstract: | |
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