UC法和exoEasy法提取鹿茸间充质干细胞外泌体的比较 |
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引用本文: | 张琦,杨春,孙胜楠,郭佳,路洪涛,刘莹,杨敏,彭英华.UC法和exoEasy法提取鹿茸间充质干细胞外泌体的比较[J].吉林农业大学学报,2024(1):140-147. |
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作者姓名: | 张琦 杨春 孙胜楠 郭佳 路洪涛 刘莹 杨敏 彭英华 |
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作者单位: | 中国农业科学院特产研究所 |
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基金项目: | 吉林省科技发展计划技术攻关项目(20190301082NY);;中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-ASTIP-2019-ISAPS); |
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摘 要: | 经原代体外分离培养及鉴定获取鹿茸间充质干细胞(Antler mesenchymal stem cells,AMSCs),分别利用超速离心法(Ultracentrifugation,UC)和膜亲和法(exoEasy)提取AMSCs培养基上清中的外泌体(Exosomes,Exo),并比较2种方法提取AMSCs-Exo效果,以及验证AMSCs-Exo的功能。结果表明:UC法和exoEasy法均能够提取到AMSCs-Exo,UC法提取的AMSCs-Exo结构更完整,杂质较少,粒径分布具有代表性,仅有单一主峰,Western blot(WB)能检测出AMSCs-Exo标志蛋白;而exoEasy法提取的AMSCs-Exo浓度较低,结构不完整,杂质较多,并且颗粒分布分散,不具有代表性,没有单一主峰,WB无法检测到Exo标志蛋白。进一步通过5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2′-deoxyuridine assay,EdU)试验证实,AMSCs-Exo可显著促进haCat细胞增殖。通过比较2种方法提取的AMSCs-Exo可知,UC法提取的AMSCs-Exo更适合相关功能验证研究中。
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关 键 词: | 鹿茸 间充质干细胞 外泌体 超速离心法 膜亲和法 |
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