大豆不同发育时期及非生物胁迫下实时荧光定量PCR内参基因筛选 |
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引用本文: | 王蕊,胡绍旺,刘金凤,张毓哲,姜玉石,刘思言,史安迪.大豆不同发育时期及非生物胁迫下实时荧光定量PCR内参基因筛选[J].吉林农业大学学报,2024(1):17-27. |
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作者姓名: | 王蕊 胡绍旺 刘金凤 张毓哲 姜玉石 刘思言 史安迪 |
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作者单位: | 吉林农业大学生命科学学院 |
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基金项目: | 国家重点研发计划子课题(2019YFD1002603-1);;吉林省自然科学基金项目(20190201168JC);;吉林省教育厅科学技术研究规划项目(2021); |
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摘 要: | 为研究大豆在不同发育时期的不同组织、不同非生物胁迫下稳定表达的最适内参基因,以大豆“JN28”V1时期的根、茎、叶,R3、R4时期的豆荚,R5、R8时期的子粒,干旱、低温、盐、脱落酸(ABA)胁迫下的根和叶共15个样本为试验材料。选择8个候选内参基因(Actin,β-actin,CYP2,EF1-α,Fbox,GAPDH,TUB4,18SrRNA)进行实时荧光定量PCR检测,并分析8个候选内参基因表达的稳定性。利用geNorm、NormFinder、BestKeeper软件分析后,再经过RefFinder计算筛选出合适的内参基因。结果表明:4个软件的分析结果不同,以RefFinder综合分析结果显示,V1期的根和叶、R3期的豆荚、ABA胁迫下的根,最适的内参基因为Actin;V1期的茎、R4期的豆荚、R8期的子粒,最适内参基因为EF1-α;R5期的子粒、干旱胁迫下的叶,最适内参基因为Fbox;干旱胁迫下的根,最适的内参基因为CYP2;盐胁迫的根、ABA胁迫下的叶,最适内参基因为18SrRNA;低温胁迫下的叶,最适内参基因为β-actin;低温胁迫下的根,最适内参基因为EF1-α和18S...
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关 键 词: | 大豆 实时荧光定量PCR 内参基因 非生物胁迫 发育时期 |
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