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番木瓜eIF4E和eIFiso4E酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活检测
引用本文:吴金燕,言普,沈文涛,周鹏.番木瓜eIF4E和eIFiso4E酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活检测[J].热带生物学报,2010,1(1):50-54.
作者姓名:吴金燕  言普  沈文涛  周鹏
作者单位:吴金燕,周鹏(海南大学,农学院,海南,海口,570228;中国热带农业科学院,热带生物技术研究所,农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海南,海口,571101);言普,沈文涛(中国热带农业科学院,热带生物技术研究所,农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海南,海口,571101) 
基金项目:国家自然科学基金项目,中央级公益性科研院所基本科研业务费资助项目 
摘    要:通过RT-PCR获得番木瓜eIF4E和eIFiso4E基因的编码区,将其分别克隆到pBD-GAL4载体中,构建酵母双杂交系统的诱饵载体pBD-GAL4-eIF4E,pBD-GAL4-eIFiso4E。测序正确后,将重组质粒导入YRG-2酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用。结果表明,获得了正确的番木瓜eIF4E,eIFiso4E基因编码区,并成功克隆到pBD-GAL4诱饵载体中,且转化有诱饵载体的YRG-2在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,在SD/-His-Trp营养缺陷平板上不能生长,说明表达产物对酵母细胞无毒性,对报告基因也无自激活作用,这为下一步利用酵母双杂交系统检测番木瓜eIF4E,eIFiso4E蛋白与病毒的相互作用奠定了基础。

关 键 词:番木瓜  eIF4E  eIFiso4E  酵母双杂交  自激活检测

Construction and Autoactivation Identification of Bait Vector Containing Papaya eIF4E and eIFiso4E Gene in Yeast Two Hybrid System
WU Jin-yan,YAN Pu,SHEN Wen-tao,ZHOU Peng.Construction and Autoactivation Identification of Bait Vector Containing Papaya eIF4E and eIFiso4E Gene in Yeast Two Hybrid System[J].Journal of Tropical Biology,2010,1(1):50-54.
Authors:WU Jin-yan  YAN Pu  SHEN Wen-tao  ZHOU Peng
Institution:1 School of Agriculture, Hainan University, Haikou 570228, China;2. Key Laboratory of Tropical Crop Biotechnology, Ministry of Agriculture, Institute of Tropical Bioscience Biotechnology, CATAS, Haikou 571101, China)
Abstract:
Keywords:eIF4E  eIFiso4E
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