| 人源弹性蛋白酶基因原核载体构建及表达 |
| |
| 引用本文： | 王海峰,许文涛,苏春元,黄昆仑,罗云波,谷新晰,邱芳萍.人源弹性蛋白酶基因原核载体构建及表达[J].沈阳农业大学学报,2010,41(5). |
| |
| 作者姓名： | 王海峰 许文涛 苏春元 黄昆仑 罗云波 谷新晰 邱芳萍 |
| |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863)项目，国家自然科学基金，国家转基因生物重大专项资助项目 |
| |
| 摘 要： | 从人体肾脏组织中提取的总RNA中通过反转录PCR(RT-PCR)扩增得到了ELA2B基因,并将其克隆到pGEM-T easy载体中.然后用限制性内切酶BamH Ⅰ和Hind Ⅲ对重组质粒pGEM-T easy/ELA2B和大肠杆菌E.coli表达质粒pET30a进行双酶切,成功构建了原核表达载体pET30a/ELA2B.将重组质粒转化大肠杆菌表达宿主BL21中,通过PCR和表型鉴定表明,ELA2B基因已经整合到大肠杆菌BL21染色体上.用IPTG对重组的大肠杆菌BL21进行诱导表达,得到的蛋白经SDS-PAGE分析结果表明:菌体中含有一明显特异性蛋白,大小为28 kD.经包涵体复性后在弹性蛋白酶活性检测平板上发现有代表弹性蛋白酶作用的透明圈产生,可初步证实表达产物具有生物活性.
|
| 关 键 词： | 人源弹性蛋白酶 大肠杆菌 基因克隆 蛋白表达 |
Construction and Expression of Prokaryotic Vector of Elastase Gene in Human |
| |
| WANG Hai-feng,XU Wen-tao,SU Chun-yuan,HUANG Kun-lun,LUO Yun-bo,GU Xin-xi,QIU Fang-ping.Construction and Expression of Prokaryotic Vector of Elastase Gene in Human[J].Journal of Shenyang Agricultural University,2010,41(5). |
| |
| Authors: | WANG Hai-feng XU Wen-tao SU Chun-yuan HUANG Kun-lun LUO Yun-bo GU Xin-xi QIU Fang-ping |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
