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禽肉产品中禽流感与新城疫病毒多重RT-PCR检测方法的建立
引用本文:单松华,汪敏,金维荣,刘俊平,秦红友,陶琦,吴徐华.禽肉产品中禽流感与新城疫病毒多重RT-PCR检测方法的建立[J].上海交通大学学报(农业科学版),2006,24(6):507-512.
作者姓名:单松华  汪敏  金维荣  刘俊平  秦红友  陶琦  吴徐华
作者单位:1. 上海出入境检验检疫局,上海,200135
2. 上海华冠生物芯片有限公司,上海,201203
摘    要:根据禽流感病毒NP基因和新城疫病毒F基因各设计1对引物,经优化单项RT-PCR(sRT-PCR)反应体系,建立的多重RT-PCR(mRT-PCR)同时检测禽流感、新城疫的极限分别为10-2.5 EID50/0.1 mL和10-3.75 EID50/0.1 mL,mRT-PCR检测禽流感的敏感性与sRT-PCR一致,mRT-PCR检测新城疫的敏感性较sRT-PCR敏感性下降2个数量级。特异性试验表明,mRT-PCR仅检测到不同亚型(H1、H3、H5、H6和H9)禽流感、不同毒力新城疫病毒,对其他9种禽病原体和SPF鸡尿囊液均未扩增出片断。mRT-PCR检测39株禽流感H1、H5和H9亚型病毒、41株不同宿主源新城疫病毒,结果与sRT-PCR、HI试验完全一致;mRT-PCR和病原分离法同时检测人工感染鸡的组织脏器,2种方法检测禽流感的符合率为93.8%(30/32),检测新城疫的符合率为95.2%(20/21);采用mRT-PCR和病原分离法同时对35份进口禽产品、32份鸡粪拭子检测,2种方法检测禽流感的符合率为100%(67/67),对新城疫的符合率为97.1%(65/67)。病原分离法的检出率虽高于mRT-PCR,经统计学分析,两者差异不显著。

关 键 词:禽流感(AIV)  新城疫病毒(NDV)  多重RT-PCR  禽产品  检测
文章编号:1671-9964(2006)06-0507-06
修稿时间:2006年6月18日

Detection and Differentiation of Avian Influenza and Newcastle Disease Virus by Multiplex RT-PCR
SHAN Song-hu,WANG Min,JING Wei-rong,LIU Jin-ping,QIN Hong-you,TAO Qi,WU Xue-hua.Detection and Differentiation of Avian Influenza and Newcastle Disease Virus by Multiplex RT-PCR[J].Journal of Shanghai Jiaotong University (Agricultural Science),2006,24(6):507-512.
Authors:SHAN Song-hu  WANG Min  JING Wei-rong  LIU Jin-ping  QIN Hong-you  TAO Qi  WU Xue-hua
Abstract:
Keywords:Avian Influenza virus  Newcastle disease virus  RT-PCR  Multiplex RT-PCR  detection
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