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基因枪法转化棉花胚性愈伤组织获得转基因植株
引用本文:郭余龙,鲁秀敏,祝钦泷,李名扬,裴炎.基因枪法转化棉花胚性愈伤组织获得转基因植株[J].农业生物技术学报,2005,13(2):162-166.
作者姓名:郭余龙  鲁秀敏  祝钦泷  李名扬  裴炎
作者单位:1. 西南农业大学生物技术中心,重庆,400716;西南农业大学园林园艺学院,重庆,400716
2. 重庆工学院
3. 西南农业大学园林园艺学院,重庆,400716
4. 西南农业大学生物技术中心,重庆,400716
摘    要:以川棉(Gossypium hirsumm,)239胚性愈伤组织为受体,用基因枪轰击法导入外源基因,获得了经Gus组织染色和PCR扩增鉴定的转基因植株。以gus基因瞬时表达蓝点数为评价指标,考察了影响基因枪转化棉花胚性愈伤组织的几个因素,结果表明:使用碱裂解法提取和PEG法纯化的质粒DNA,优于试剂盒大量提取的DNA;当轰击压力为10.7MPa时,轰击距离6或9cm较好;轰前经1-2周培养的愈伤组织较佳。实验还表明,玉米的Ubi启动子在棉花胚性愈伤组织中有启动活性。轰击后直接用100mg/L的卡那霉素进行筛选优于梯度筛选。

关 键 词:胚性愈伤组织  转基因植株  基因枪法转化  棉花  基因枪轰击法  PCR扩增  gus基因  基因枪转化  质粒DNA  外源基因  评价指标  瞬时表达  PEG法  碱裂解法  卡那霉素  Gus  试剂盒  启动子  提取  导入  玉米  选优
修稿时间:2004年4月26日

Genetic Transformation of Cotton Embryogenic Callus by Particle Bombardment and Regeneration of Transgenic Plants
GUO Yu-long,LU Xiu-Min,ZHU Qin-Long,LI Ming-yang,PEI Yan.Genetic Transformation of Cotton Embryogenic Callus by Particle Bombardment and Regeneration of Transgenic Plants[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2005,13(2):162-166.
Authors:GUO Yu-long  LU Xiu-Min  ZHU Qin-Long  LI Ming-yang  PEI Yan
Abstract:
Keywords:
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