猪囊虫酸性核糖体磷蛋白基因P2重组杆状病毒的构建及鉴定 |
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引用本文: | 骆学农,才学鹏,庄文忠.猪囊虫酸性核糖体磷蛋白基因P2重组杆状病毒的构建及鉴定[J].中国兽医科技,2003,33(4):13-16. |
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作者姓名: | 骆学农 才学鹏 庄文忠 |
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作者单位: | [1]中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046 [2]山东省农业科学院生命科学研究中心,山东济南250030 |
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摘 要: | 用O1igo(dT)软件设计了1对酸性核糖体磷蛋白P2(arpP2)基因特异引物,以pUCl8—P2为模板,经PCR扩增出366bP的猪囊虫arPP2片段,酶切回收后与经过相同处理的pFASTBAC供体质粒连接,转化DH5α感受态细胞;对重组质粒经酶切和PCR鉴定后再转化DHl0BAc感受态细胞,提取高分子BacmidDNA,用Lipofectin法转染Sf9单层昆虫细胞,待出现细胞病变后收集培养上清液,重新感染昆虫细胞,提取细胞DNA进行PCR鉴定,证明含有arPP2基因的重组杆状病毒成功地感染了昆虫细胞。
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关 键 词: | 猪囊虫 酸性核糖体磷蛋白基因P2 重组杆状病毒 囊虫病 功能性抗原 |
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