| 镰形扇头蜱唾液腺抑制消减杂交文库的构建和分析 |
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| 引用本文： | 向飞宇,周金林,周勇志,龚海燕,沈杰.镰形扇头蜱唾液腺抑制消减杂交文库的构建和分析[J].中国农业科学,2006,39(11):2347-2353. |
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| 作者姓名： | 向飞宇 周金林 周勇志 龚海燕 沈杰 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所 |
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| 基金项目： | 国家基础研究重大前期项目;上海市自然科学基金 |
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| 摘 要： | 【目的】寻找镰形扇头蜱吸血后较吸血前唾液腺差异表达基因。【方法】以抑制消减杂交法分别构建镰形扇头蜱半饱血雌蜱和吸血雄蜱唾液腺以pGEM-T-easy为载体的cDNA文库，并测序进行生物信息学分析。【结果】分别测得247个雌蜱有效EST序列和168个雄蜱有效EST序列，并预测雌蜱可能含有5′末端和3′末端的EST序列分别为25个和44个，雄蜱可能含有5′末端和3′末端EST序列分别为53个和74个。随机选择非重复的24个雌蜱序列和21个雄蜱序列以RT-PCR方法验证消减效果；在吸血后唾液腺中，雌蜱有13个基因表达上调或新表达，消减效率为54%，雄蜱有9个基因表达上调或新表达，消减效率为43%。对所测有效序列经BLAST分析，检索247个雌蜱序列获得141个匹配，匹配率为57%，其中有32个蜱基因，占141个匹配基因的23%；检索168个雄蜱序列获得125个匹配，匹配率为74%，其中有29个蜱基因，占125个匹配基因的23%。BLAST检索结果显示这些蛋白主要包括帮助蜱口器固定免疫调节蛋白、抗凝血蛋白、加强能量代谢的线粒体蛋白和促进基因转录的各种转录因子。【结论】这些蛋白主要是为了适应蜱吸血的生理过程及应变蜱因吸血而产生的免疫防御和排斥。
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| 关 键 词： | 镰形扇头蜱 唾液腺 抑制消减杂交 cDNA文库 表达序列标签 |
| 收稿时间： | 2005-07-18 |
| 修稿时间： | 2005-07-182006-08-16 |
Construction and Sequence Analyse of Two Salivary Gland cDNA SSH Libraries of Rhipicephalus haemaphysaloides haemaphysaloides |
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| XIANG Fei-yu,ZHOU Jin-lin,ZHOU Yong-zhi,GONG Hai-yan,SHEN Jie.Construction and Sequence Analyse of Two Salivary Gland cDNA SSH Libraries of Rhipicephalus haemaphysaloides haemaphysaloides[J].Scientia Agricultura Sinica,2006,39(11):2347-2353. |
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| Authors: | XIANG Fei-yu ZHOU Jin-lin ZHOU Yong-zhi GONG Hai-yan SHEN Jie |
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| Institution: | 1Shanghai Institute of Animal Parasitology, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Key Lab of Animal Parasitology of Ministry of Agriculture, Shanghai 200232; 2Shanghai lnsititute of Cardiovascular Diseases, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai 200032 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rhipicephalus haemaphysaloides haemaphysaloides Salivary gland Suppression subtractive hybridization(SSH) cDNA library Expression sequence tag(EST) |
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