牛结核分枝杆菌MPB70蛋白分泌性载体的构建与蛋白表达 |
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引用本文: | 贾浩,周晶,徐广贤,李娟,张艳,许涛,王玉炯.牛结核分枝杆菌MPB70蛋白分泌性载体的构建与蛋白表达[J].黑龙江畜牧兽医,2010(11). |
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作者姓名: | 贾浩 周晶 徐广贤 李娟 张艳 许涛 王玉炯 |
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作者单位: | 宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室; |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(30860207); “973”国家重点基础研究发展计划项目(2006CB504401); 高等学校科技创新工程重大项目培育资金项目(706057) |
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摘 要: | 为了研究牛结核病新型诊断抗原,试验根据GenBank中Mycobacterium bovis基因序列设计1对引物,将牛结核分枝杆菌MPB70基因构建到pET22b(+)原核表达载体上,将重组载体转到E.coliBL21(DE3)中,经IPTG诱导获得高效表达,并进行SDS-PAGE和Westen-blot分析。结果表明:MPB70蛋白以可溶形式在细胞周质中表达,有部分蛋白以包涵体形式在细胞质中表达,其分子质量约为30ku,蛋白表达量占菌体总蛋白的20%;重组MPB70蛋白可与牛分枝杆菌阳性血清发生特异性反应。说明重组MPB70蛋白能够作为诊断抗原。
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关 键 词: | 牛结核分枝杆菌 MPB70 表达 Western-blot |
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