| 微载体规模化培养草鱼细胞与病毒的工艺及优化 |
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| 引用本文： | 刘秋凤,曾令兵,周勇,马杰,范玉顶,张辉,李瑞伟.微载体规模化培养草鱼细胞与病毒的工艺及优化[J].淡水渔业,2013(4):69-75. |
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| 作者姓名： | 刘秋凤 曾令兵 周勇 马杰 范玉顶 张辉 李瑞伟 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学水产与生命科学学院;中国水产科学研究院长江水产研究所 |
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| 基金项目： | 国家现代农业产业技术体系建设“大宗淡水鱼类产业技术体系”专项资金(编号CARS-46-11) |
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| 摘 要： | 研究了在悬浮培养系统中使用微载体Cephodex规模化培养草鱼肾脏组织细胞CIK和草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的条件并进行了优化。结果表明,Cephodex是一种适合CIK细胞贴壁生长的微载体,搅拌方式(搅拌时间/静止时间)及血清浓度(0%、5%、10%、15%)对CIK细胞在Cephodex微载体上的贴附效率有影响。贴附期以转速35 r/min、每静置45 min搅拌2 min的间歇搅拌方式最佳,8 h后细胞贴附率可达90%以上;细胞贴附期培养基中的血清浓度为5%。当Cephodex微载体用量10 mg/mL、细胞初始接种密度2.5×105cells/mL、连续搅拌速度40 r/min时可获得最佳的细胞生长效能。用优化的最佳工艺条件大规模培养CIK细胞,接种感染复数为0.1的GCRV病毒3 d后,培养细胞出现典型细胞病变效应,病毒滴度(lgTCID50/mL)为8.5。本项研究为草鱼出血病疫苗规模化制备技术研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 草鱼肾脏组织细胞系(CIK) 草鱼呼肠孤病毒(GCRV) 微载体 大规模培养 工艺与优化 |
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