| 李属植物检疫性丁香疫霉和栗黑水疫霉的三重PCR分子检测 |
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| 引用本文： | 刘跃庭,朱林慧,李培江,廖芳,任学毅,李关荣.李属植物检疫性丁香疫霉和栗黑水疫霉的三重PCR分子检测[J].植物保护学报,2015,42(4):571-577. |
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| 作者姓名： | 刘跃庭 朱林慧 李培江 廖芳 任学毅 李关荣 |
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| 作者单位： | 西南大学, 南方山地农业教育部工程研究中心, 重庆 400715;天津出入境检验检疫局, 天津 300461;西南大学, 南方山地农业教育部工程研究中心, 重庆 400715;西南大学, 南方山地农业教育部工程研究中心, 重庆 400715;天津出入境检验检疫局, 天津 300461;重庆市食品药品检验所, 重庆 401121;西南大学, 南方山地农业教育部工程研究中心, 重庆 400715 |
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| 基金项目： | 国家质检总局项目(2012IK286,2013IK290),国家"十二五"科技支撑计划(2012BAK11B02) |
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| 摘 要： | 为建立我国禁止进境的2种检疫性真菌丁香疫霉Phytophthora syringae和栗黑水疫霉P.cambivora的同步分子检测方法,根据疫霉属的18S rRNA、HSP90和Ypt1基因分别设计通用引物、丁香疫霉和栗黑水疫霉的特异性引物,建立三重PCR检测方法,并进行灵敏度测试和模拟带菌试验。结果表明,可同时检测李属植物上丁香疫霉和栗黑水疫霉的特异三重PCR检测体系为:最佳引物浓度组合18SUF/18SUR、PCSF/PCSR和PSSF/PSSR依次为0.2、0.8、1.0μL,最佳退火温度为63℃,最佳退火时间为20 s。该体系扩增丁香疫霉出现884 bp的18S rRNA条带和683 bp的HSP90基因特异条带,扩增栗黑水疫霉出现884 bp的18S rRNA条带和314 bp的Ypt1基因特异条带,对照菌只出现18S rRNA条带;三重PCR反应体系检测灵敏度低于单重PCR;模拟带菌试验可同时扩增出3个片段。表明该三重PCR检测方法能实现丁香疫霉和栗黑水疫霉的同步特异性检测,可有效改进李属类水果及其种苗上检疫性疫霉的快速检测。
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| 关 键 词： | 李属 检疫性真菌 丁香疫霉 栗黑水疫霉 三重PCR检测 |
| 收稿时间： | 7/6/2014 12:00:00 AM |
Triplex-PCR molecular detection of two quarantine fungal diseases of Prunus spp., Phytophthora syringae and P. cambivora |
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| Liu Yueting,Zhu Linhui,Li Peijiang,Liao Fang,Ren Xueyi and Li Guanrong.Triplex-PCR molecular detection of two quarantine fungal diseases of Prunus spp., Phytophthora syringae and P. cambivora[J].Acta Phytophylacica Sinica,2015,42(4):571-577. |
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| Authors: | Liu Yueting Zhu Linhui Li Peijiang Liao Fang Ren Xueyi and Li Guanrong |
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| Institution: | Engineering Research Center of South Upland Agriculture of the Ministry of Education, Southwest University, Chongqing 400715, China;Tianjin Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Tianjin 300461, China;Engineering Research Center of South Upland Agriculture of the Ministry of Education, Southwest University, Chongqing 400715, China;Engineering Research Center of South Upland Agriculture of the Ministry of Education, Southwest University, Chongqing 400715, China;Tianjin Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Tianjin 300461, China;Chongqing Institute for Food and Drug Control, Chongqing, 401121, China;Engineering Research Center of South Upland Agriculture of the Ministry of Education, Southwest University, Chongqing 400715, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Prunus quarantine fungus Phytophthora syringae P cambivora triplex-PCR detection |
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