摘 要: | 为了建立快速检测猪瘟病毒(CSFV)环介导等温扩增(LAMP)方法,试验利用Primer Explorer4.0(https://primerexplorer.jp/)针对CSFV的NS3基因设计LAMP引物,并对LAMP反应体系、反应条件进行优化,评定其特异性和敏感性。结果表明:该方法可在65℃、50 min内快速扩增CSFV,扩增结果可通过可视的颜色判断;LAMP反应对猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)等无交叉反应,其检测CSFV的最低浓度为13.6 fg/μL,对临床样品的检出率高于RT-PCR技术。说明LAMP方法灵敏、准确,操作快速、方便,可用于猪瘟的临床诊断。
|