玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及其表达载体构建 |
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引用本文: | 曹路遥,周岩,魏琦超,陈燕绘,陈亚东,蔺一帆,田瑞婷.玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及其表达载体构建[J].河南农业科学,2018(5). |
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作者姓名: | 曹路遥 周岩 魏琦超 陈燕绘 陈亚东 蔺一帆 田瑞婷 |
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作者单位: | 河南科技学院生命科技学院/现代生物育种河南省协同创新中心;河南省华隆生物技术有限公司 |
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摘 要: | 为了克隆磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)的编码基因以用于表达载体的构建,本研究根据已公开的序列信息设计特异性引物,以玉米自交系ZD410的叶片DNA为模板,通过PCR技术成功克隆了pepc基因的全长序列。生物信息学分析发现,该基因完整ORF长度为2 913 bp,编码蛋白质分子质量约为108.179 ku,等电点(PI)为5.73;对其氨基酸序列进行同源性检索分析显示,该蛋白质与其他C4植物的PEPC蛋白具有极高的同源性;利用Gateway技术构建含pepc目的基因的表达载体,并通过农杆菌介导的花序浸染法将该基因导入野生型拟南芥。
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