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节瓜CqWRKY1基因的遗传转化
引用本文:杜翔斐,彭庆务,江彪,金庆敏,姚春鹏,林毓娥,何晓明,王永飞.节瓜CqWRKY1基因的遗传转化[J].核农学报,2018(6).
作者姓名:杜翔斐  彭庆务  江彪  金庆敏  姚春鹏  林毓娥  何晓明  王永飞
作者单位:暨南大学生物工程学系;广东省农业科学院蔬菜研究所;广东省蔬菜新技术研究重点实验室
摘    要:为建立和优化节瓜的遗传转化体系,并高效地完成CqWRKY1基因的遗传转化,本研究以节瓜A39为材料,通过RT-PCR技术克隆了节瓜CqWRKY1基因,采用Gateway同源重组法构建了pEarleyGate101-CqWRKY1超表达载体,以节瓜子叶节为外植体,利用农杆菌介导的遗传转化法进行转化。结果表明,子叶节不定芽诱导的最适培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)6-BA+1 mg·L~(-1)ABA,诱导率可达76.17%;生根的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg·L~(-1)IAA;农杆菌侵染的最佳条件为农杆菌浓度OD_(600)为0.3、侵染时间为10 min、共培养时间为3 d;最佳的抑菌抗生素为500 mg·L~(-1)的头孢霉素。本研究在181株拟转基因组培苗中共得到76株阳性T_0转基因组培苗,其中共有37株移栽成活。PCR结果表明,CqWRKY1已成功整合到37株转化植株的基因组中。本研究结果为进一步研究CqWRKY1基因的功能奠定了一定的理论基础。

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