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结核分枝杆菌ACR蛋白的原核表达及纯化
引用本文:曹旭东,陈创夫.结核分枝杆菌ACR蛋白的原核表达及纯化[J].中国预防兽医学报,2009,31(7).
作者姓名:曹旭东  陈创夫
作者单位:1. 石河子大学,医学院,新疆,石河子,832002;石河子大学,动物科技学院,新疆,石河子,832002
2. 石河子大学,动物科技学院,新疆,石河子,832002
基金项目:国际科技合作项目基金,石河子大学科研基金 
摘    要:为获得区别结核感染状态的血清学鉴别诊断试剂的抗原,根据GenBank中登录的结核杆菌H37Rv的ACR基因序列设计1对引物,以热灭活的结核杆菌H37Rv菌悬液为模板,PCR扩增得到ACR基因DNA片段.将扩增片段克隆于pGM-T载体中,得到载体pGM-T-ACR.分别将pET32a质粒和pGM-T-ACR质粒用限制性内切酶BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切,并将纯化的ACR基因亚克隆至pET32a中,获得重组表达质粒pET32a-ACR.将其转化E.coli BL21 IPTG诱导后,经SDS-PAGE、western blot分析鉴定,可见约34 ku的外源蛋白带.表明ACR基因在大肠杆菌中得到了表达.用Ni-NTA Agarose试剂盒进行蛋白纯化,获得纯化的ACR融合蛋白.

关 键 词:结核分枝杆菌  原核表达

Expression and purification of ACR protein of Mycobacterium tuberculosis in E.coli
CAO Xu-dong,CHEN Chuang-fu.Expression and purification of ACR protein of Mycobacterium tuberculosis in E.coli[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2009,31(7).
Authors:CAO Xu-dong  CHEN Chuang-fu
Abstract:
Keywords:ACR
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