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堆形艾美耳球虫巨噬细胞移动抑制因子的克隆和表达
引用本文:阎晓菲,韩红玉,黄兵,岳城,赵其平,姜连连,董辉,卞庆松,张建哲.堆形艾美耳球虫巨噬细胞移动抑制因子的克隆和表达[J].中国预防兽医学报,2008,30(11).
作者姓名:阎晓菲  韩红玉  黄兵  岳城  赵其平  姜连连  董辉  卞庆松  张建哲
作者单位:1. 中国农业科学院,上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200240;新疆农业大学,动物医学学院,新疆,乌鲁木齐,830052
2. 中国农业科学院,上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200240
3. 新疆农业大学,动物医学学院,新疆,乌鲁木齐,830052
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划) , 国家科技基础条件平台建设项目  
摘    要:本研究扩增和克隆了堆形艾美耳球虫巨噬细胞移动抑制因子,并在大肠杆菌中表达出MIF重组蛋白。根据GenBank中的MIF mRNA序列,设计特异引物,采用PCR方法以堆形艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库为模板扩增获得MIF基因,将MIF基因片段连接到原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达质粒pET28a—MIF,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,对表达产物进行Western blot分析。结果从堆形艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库中扩增出MIF基因片段,长度为709bp;经序列分析,扩增片段的核苷酸序列与GenBank中登录的MIF序列的同源性为99.5%;经SDS-PAGE检测表明重组质粒pET(28a)-MIF在大肠杆菌中以包涵体形式表达;Western blot分析证明堆形艾美耳球虫抗血清可与重组表达蛋白特异性结合。本研究结果为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

关 键 词:球虫  堆形艾美耳球虫  巨噬细胞移动抑制因子  克隆  表达

Cloning and expression of macrophage migration inhibitory factor from Eimeria acervulina
YAN Xiao-fei,HAN Hong-yu,HUANG Bing,YUE Cheng,ZHAO Qi-ping,JIANG Lian-lian,DONG Hui,BIAN Qing-song,ZHANG Jian-zhe.Cloning and expression of macrophage migration inhibitory factor from Eimeria acervulina[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2008,30(11).
Authors:YAN Xiao-fei  HAN Hong-yu  HUANG Bing  YUE Cheng  ZHAO Qi-ping  JIANG Lian-lian  DONG Hui  BIAN Qing-song  ZHANG Jian-zhe
Abstract:
Keywords:
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