萧山鸡IL-2基因真核表达载体构建及其在Vero细胞中的表达 |
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引用本文: | 谢荣辉,方维焕,李建荣,卢觅佳,于涟.萧山鸡IL-2基因真核表达载体构建及其在Vero细胞中的表达[J].浙江农业大学学报,2003,29(6):649-654. |
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作者姓名: | 谢荣辉 方维焕 李建荣 卢觅佳 于涟 |
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作者单位: | 浙江大学动物预防研究所,浙江杭州310029 |
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摘 要: | 扩增萧山鸡白细胞介素2(IL-2)基因,将其插入真核表达载体pCI构建重组质粒pCI-IL-2,高压电击法将重组质粒转化入减毒沙门氏菌,并直接转染Vero细胞,提取细胞总DNA,DIG标记探针可检测到阳性杂交信号.用FITC标记的羊抗兔IgG进行间接免疫荧光试验,可检测到特异性黄绿色荧光.SDS-PAGE和Western blotting可检测到18.5kD和14.5kD的蛋白条带.表明减毒沙门氏菌能将重组质粒pCI-IL-2携带进入Vero细胞内表达IL-2,且表达产物具有免疫反应性,为今后研制鸡IL-2基因作为口服免疫增强剂提供了依据.
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关 键 词: | 萧山鸡 IL-2基因 真核表达载体 Vero细胞 减毒沙门氏菌 白细胞介素2 |
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