| 驯鹿β-防御素reBD-1全长cDNA的克隆及序列分析 |
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| 引用本文： | 杨银凤,郝永峰,赵艳芳,余兴帮,都格尔斯仁.驯鹿β-防御素reBD-1全长cDNA的克隆及序列分析[J].中国兽医学报,2008,28(6). |
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| 作者姓名： | 杨银凤 郝永峰 赵艳芳 余兴帮 都格尔斯仁 |
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| 作者单位： | 1. 内蒙古农业大学动物胚胎与发育生物学研究室,内蒙古呼和浩特,010018
2. 呼伦贝尔市兽医站,内蒙古海拉尔,021008
3. 呼伦贝尔市鄂温克旗农牧业局,内蒙古,鄂温克旗,021000 |
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| 基金项目： | 内蒙古自然科学基金
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内蒙古农业大学校科研和教改项目 |
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| 摘 要： | 为了获得驯鹿β-防御素reBD-1全长cDNA序列,根据已获得的reBD-1cDNA的已知序列设计1条序列特异性引物作为上游引物,反转录引物中的部分序列即3′接合器引物作为下游引物,克隆reBD-1cDNA的3′末端序列。另外,采用反向嵌套PCRRACE法,根据reBD-1cDNA的已知序列,设计1条5′末端磷酸化的特异性反转录引物和2对特异性反向嵌套PCR引物,首先进行反转录(RT),然后将mRNA反转录成的cDNA进行环化,最后进行反向嵌套巢式PCR,克隆reBD-1cDNA的5′末端序列。结果成功的克隆出了reBD-1cDNA的3′和5′末端序列,从而得到372bp的reBD-1cDNA全序列,其中包含44bp5′非翻译区(UTR)、192bp的开放读码框(ORF)、终止密码子TAA、118bp的3′UTR和poly(A)15。reBD-1cDNA全序列的获得为进一步研究其基因结构、基因表达和基因功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 反向嵌套 PCR 5'RACE 3'RACE β-防御素 驯鹿 驯鹿 防御素 克隆 序列分析 analysis Cloning 基因功能 基因表达 基因结构 研究 poly 终止密码子 开放读码框 非翻译区 全序列 结果 巢式 mRNA 反转录引物 磷酸化 |
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