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| 鸭瘟病毒dUTPase基因克隆、原核表达及在病毒感染宿主亚细胞中的定位分析 | |
| 引用本文： | 招丽婵,程安春,汪铭书,袁桂萍,贾仁勇,周登春,葛菡,孙涛,陈孝跃.鸭瘟病毒dUTPase基因克隆、原核表达及在病毒感染宿主亚细胞中的定位分析[J].畜牧兽医学报,2008,39(8). |
| 作者姓名： | 招丽婵 程安春 汪铭书 袁桂萍 贾仁勇 周登春 葛菡 孙涛 陈孝跃 |
| 作者单位： | 1. 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心,雅安,625014 2. 四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心,雅安,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,雅安,625014 3. 四川大学分析测试中心,成都,610064 4. 动物疫病与人类健康四川省重点实验室,雅安,625014 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，教育部跨世纪优秀人才培养计划，高校科技创新工程项目，四川省基础研究重大项目，四川省重点学科建设项目 |
| 摘 要： | 根据笔者实验室新发现的鸭瘟病毒（DPV）dUTPase基因（GenBank登录号DQ486149）序列设计1对引物，PCR扩增后将产物亚克隆至pET32a（＋）原核表达载体，获得表达质粒pET32a-DU。然后将其转化至E．coliBL21（DE3）进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测显示诱导表达蛋白约66．8ku，与预期表达蛋白大小一致。薄层扫描分析表明重组蛋白占菌体总蛋白的36．2％，主要以包涵体的形式存在。重组蛋白纯化后制备兔抗血清，间接EUSA效价为1：409600。通过免疫荧光技术进行DPVdUTPase亚细胞定位检测，结果显示最早可在感染后4h的胞质中检测到特异性荧光，12h大量点状绿色荧光聚集于胞核；24h后胞核内点状荧光减弱，而胞质点状荧光增强；48h胞核和胞质荧光均显著减弱。本研究为DPVdUTPase基因功能和DPV致病机理的研究提供了重要数据。 |
| 关 键 词： | 鸭瘟病毒 dUTPase基因 克隆 表达 亚细胞定位 |
Clone, Prokaryotic Expression of DPV dUTPase Gene and Its Subcellular Localization in Virus-infected Host Cells |
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| ZHAO Li-chan,CHENG An-chun,WANG Ming-shu,YUAN Gui-ping,JIA Ren-yong,ZHOU Deng-chun,GE Han,SUN Tao,CHEN Xiao-yue.Clone, Prokaryotic Expression of DPV dUTPase Gene and Its Subcellular Localization in Virus-infected Host Cells[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2008,39(8). | |
| Authors: | ZHAO Li-chan CHENG An-chun WANG Ming-shu YUAN Gui-ping JIA Ren-yong ZHOU Deng-chun GE Han SUN Tao CHEN Xiao-yue |
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| Keywords: | |
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