| 重组牛α-干扰素的原核表达与纯化 |
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| 引用本文： | 张弦,缪德年,廖学文,黄克和,张克春.重组牛α-干扰素的原核表达与纯化[J].畜牧与兽医,2015(3):97-101. |
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| 作者姓名： | 张弦 缪德年 廖学文 黄克和 张克春 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院;上海市农业科学院;上海市奶牛研究所 |
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| 基金项目： | 上海优质原料奶质量控制技术标准群的构建(14DZ0501300);上海优质原料奶产业技术创新战略联盟(13DZ0510900) |
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| 摘 要： | 为在大肠杆菌表达系统中高效表达牛α-干扰素(bovine interferon-α,Bo IFN-α),将经密码子优化后的牛α-干扰素成熟蛋白基因合成并克隆到表达载体p Cold II中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,获得可溶性的表达蛋白。对重组菌表达条件进行优化,结果显示在IPTG浓度为0.64 mmol/L,诱导温度为15℃,诱导时间为9 h的条件下,可溶性目的蛋白的表达量最高。重组蛋白经镍柱纯化后的纯度为99.2%,表达量为36 mg/L菌液。重组蛋白在MDBK细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为1×106U/mg。
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| 关 键 词： | 牛α-干扰素 原核表达 纯化 |
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