| 猪伪狂犬病病毒糖蛋白gD在谷氨酸棒杆菌中的表达及优化 |
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| 引用本文： | 惠萌萌,孙曼曼,刘秀霞,杨艳坤,白仲虎.猪伪狂犬病病毒糖蛋白gD在谷氨酸棒杆菌中的表达及优化[J].江苏农业学报,2022(6):1578-1585. |
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| 作者姓名： | 惠萌萌 孙曼曼 刘秀霞 杨艳坤 白仲虎 |
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| 作者单位： | 1. 江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心;2. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室;3. 江苏省生物活性制品加工工程技术研究中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(22078128、21878124)； |
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| 摘 要： | 为在谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)中进行猪伪狂犬病病毒糖蛋白gD(Glycoprotein gD of porcine pseudorabies virus)的可溶性表达，通过启动子、底盘菌株和发酵条件的优化，提高gD在C.glutamicum中的表达量，使用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western Blot方法进行表达产物的分析与鉴定，用镍离子亲和层析柱纯化产物。SDS-PAGE和Western Blot分析结果表明，gD在谷氨酸棒杆菌表达系统获得正确表达，相对分子质量约4.5×104,可与猪抗gD阳性血清特异性反应。摇瓶培养下最优发酵条件为诱导温度30℃,诱导时长24 h,优化后gD质量浓度可达到517 mg/L。
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| 关 键 词： | 谷氨酸棒杆菌 猪伪狂犬病病毒 糖蛋白gD 发酵优化 |
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