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ORF3基因缺失对猪圆环病毒Ⅱ型感染复制能力的影响
引用本文:杨晓农,郭万柱,徐志文,王新,殷华平,王小玉,龙虎.ORF3基因缺失对猪圆环病毒Ⅱ型感染复制能力的影响[J].中国兽医学报,2008,28(9).
作者姓名:杨晓农  郭万柱  徐志文  王新  殷华平  王小玉  龙虎
作者单位:1. 四川农业大学动物生物术中心,四川,雅安,625014;西南民族大学生命科学与技术学院,四川,成都,610041
2. 四川农业大学动物生物术中心,四川,雅安,625014
3. 西北农林科技大学动物科技学院,陕西,杨凌,712100
4. 韶关学院英东生物工程学院,广东,韶关,512005
5. 西南民族大学生命科学与技术学院,四川,成都,610041
基金项目:国家自然科学基金,教育部长江学者和创新团队发展计划
摘    要:设计1对特异性引物AF-P1/AF-P2,从疑似PCV2感染的病料中扩增获得1 767 bp的PCV2全基因组(命名为PCV2-CD),克隆至pMD18-T Simple载体构建重组质粒pTS-PCV2-CD.序列分析表明:PCV2-CD与GenBank中公布的12个PCV2毒株间的同源性高达95.0%~100%.用Nco Ⅰ酶切pTS-PCV2-CD获得4 459 bp线性目的DNA片段,补平CATG 4个碱基、连接环化构建ORF3基因插入缺失重组质粒pTS-PCV2-CD-C并测序.用Sac Ⅱ酶切pTS-PCV2-CD-C.回收1 771 bp线性目的片段,体外连接环化构建了ORF3基因缺失突变毒株mPCV2-C.PCR-RFLP检测表明,在脂质体转染法转染mPCV2-C、培养并盲传4代的IBRS-2细胞中(PCVl阴性),特异性检测到mPCV2-C的DNA;电镜观察发现,在盲传6代的IBRS-2细胞胞核内观察到突变毒株的病毒颗粒.试验结果表明:ORF3基因缺失突变毒株mPCV2-C具有感染性,能够在IBRS-2细胞中复制增殖,证实ORF3基因不是PCV2复制的必需基因.

关 键 词:猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)  ORF3基因  基因功能

Influence of ORF3 gene deletion on infecting and replicating ability of porcine cirovirus type 2
YANG Xiao-nong,GUO Wan-zhu,XU Zhi-wen,WANG Xin,YIN Hua-ping,WANG Xiao-yu,LONG Hu.Influence of ORF3 gene deletion on infecting and replicating ability of porcine cirovirus type 2[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(9).
Authors:YANG Xiao-nong  GUO Wan-zhu  XU Zhi-wen  WANG Xin  YIN Hua-ping  WANG Xiao-yu  LONG Hu
Abstract:
Keywords:
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