| 梅花鹿γ-干扰素在不同真核细胞系中稳定表达的研究 |
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| 引用本文： | 刘颖,王冰,于清龙,熊家军,杨利国,陈焕春,郭爱珍.梅花鹿γ-干扰素在不同真核细胞系中稳定表达的研究[J].中国畜牧兽医,2010,37(5). |
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| 作者姓名： | 刘颖 王冰 于清龙 熊家军 杨利国 陈焕春 郭爱珍 |
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| 作者单位： | 刘颖,王冰,于清龙,陈焕春,郭爱珍,LIU Ying,WANG Bing,YU Qing-long,CHEN Huan-chun,GUO Ai-zhen(华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,武汉,430070;华中农业大学动物医学院预防兽医学省重点实验室,武汉,430070);熊家军,杨利国,XIONG Jia-jun,YANG Li-guo(华中农业大学动物科技学院,武汉,430070) |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973计划)，湖北省自然科学基金重大项目，艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技重大专项 |
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| 摘 要： | 提取经植物血凝素诱导培养的梅花鹿外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出梅花鹿γ-干扰素成熟蛋白基因,经克隆测序表明与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100%。将其重组到含有CMV增强子的真核表达载体质粒pCI-neo上。利用磷酸钙介导转染法将重组载体质粒pCI-neo-CerIFN-γ转染入中国仓鼠肾细胞(BHK-21)和牛肾细胞(MDBK)中,在G418抗性压力下进行筛选培养获得了稳定分泌表达的转染细胞系。通过Western blotting检测确定表达产物的相对分子质量分别为23、20、16ku,与预测大小一致。本研究成果为进一步开发梅花鹿生物制品类治疗制剂奠定了基础。
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| 关 键 词： | 梅花鹿 γ-干扰素 细胞系 真核表达 |
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