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枇杷质膜水孔蛋白基因EjPIP1的克隆及AM真菌对其表达的影响
引用本文:张燕,李娟,姚青,陈杰忠,胡又厘.枇杷质膜水孔蛋白基因EjPIP1的克隆及AM真菌对其表达的影响[J].中国农业科学,2014,47(7):1387-1396.
作者姓名:张燕  李娟  姚青  陈杰忠  胡又厘
作者单位:1、华南农业大学园艺学院,广州 510642; 2、贵州大学农学院/贵州省果树工程技术研究中心,贵阳 550025; 3、仲恺农业工程学院,广州 510225
基金项目:国家自然科学基金项目(30871692,31000892);广东省现代农业技术体系岭南水果创新团队项目;教育部博士点基金(20104404110012)
摘    要:【目的】克隆‘早钟6号’枇杷(Eriobotrya japonica ‘Zaozhong 6’)的一个质膜水孔蛋白(plasma membrane intrinsic protein,PIP)基因,分析其序列特征,研究接种丛枝菌根(Arbuscular mycorrhizal,AM)真菌对枇杷水分利用效率(water use efficiency,WUE)及对质膜水孔蛋白基因表达模式的影响。【方法】以‘早钟6号’枇杷实生苗为材料,通过盆栽试验,设置2个处理(AM和NM),5个重复,利用光合测定系统对叶片水平上水分利用效率进行测定;采用RT-PCR和RACE技术克隆该基因的cDNA全长,结合生物信息学软件对其序列特征进行分析,利用实时荧光定量PCR(Real time-PCR)分析接种AM真菌后该基因在枇杷叶片和根中的表达模式。【结果】在有效的光合同化时间(7:00-17:00)内,接种AM真菌显著的提高了枇杷的水分利用效率。克隆得到枇杷质膜水孔蛋白基因EjPIP1(GenBank登录号:JX041627),cDNA全长为1 142 bp,编码区含861 bp,共编码286个氨基酸。氨基酸序列分析表明,EjPIP1具有水孔蛋白家族高度保守的2个NPA(Asn-Pro-Ala,天冬氨酸-脯氨酸-丙氨酸)基序。同源性分析显示,枇杷EjPIP1氨基酸序列与已报道的苹果(Malus domestica)、桃(Prunus persica)和智利草莓(Fragaria chiloensis)等高等植物的氨基酸序列同源性很高,分别为97%、92%和90%。Real time-PCR分析结果证实,EjPIP1在枇杷叶片和根中均有表达,并且叶片中的相对表达量略高于根中。正常供水条件下,接种AM真菌后,该基因在根中表达上调,在叶片中表达下调。【结论】接种AM真菌提高了‘早钟6号’枇杷叶片水平上水分利用效率。从枇杷叶片中克隆得到了一个质膜水孔蛋白类的基因EjPIP1,实时荧光定量PCR分析表明该基因在枇杷叶片和根中表达受AM真菌的影响,该基因的表达模式有利于提高AM植株的水分利用效率。

关 键 词:枇杷  丛枝菌根  水孔蛋白  克隆  表达分析  
收稿时间:2013-07-10

Cloning of a Plasma Membrane Aquaporin Gene EjPIP1 in Eriobotrya japonica Leaves and Its Expression Analysis After AM Fungi Inoculation
ZHANG Yan-,LI Juan-,YAO Qing-,CHEN Jie-Zhong-,HU You-Li-.Cloning of a Plasma Membrane Aquaporin Gene EjPIP1 in Eriobotrya japonica Leaves and Its Expression Analysis After AM Fungi Inoculation[J].Scientia Agricultura Sinica,2014,47(7):1387-1396.
Authors:ZHANG Yan-  LI Juan-  YAO Qing-  CHEN Jie-Zhong-  HU You-Li-
Institution:1、College of Horticulture, South China Agricultural University, Guangzhou 510642; 2、Agricultural College,Guizhou University/Guizhou Engineering Research Center for Fruit Crops,Guiyang 550025; 3、Zhongkai University of Agriculture and Engineering,Guangzhou 510225
Abstract:
Keywords:Eriobotrya japonica  arbuscular mycorrhizal  aquaporin  cloning  expression analysis
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