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水稻干尖线虫14-3-3(Ab-14-3-3-a)基因克隆与功能分析
引用本文:魏利辉,冯辉,张金凤,陈曦,杨红福,姚克兵.水稻干尖线虫14-3-3(Ab-14-3-3-a)基因克隆与功能分析[J].植物病理学报,2018,48(4):527-536.
作者姓名:魏利辉  冯辉  张金凤  陈曦  杨红福  姚克兵
作者单位:南京农业大学植物保护学院,南京 210095;
江苏省农业科学院植物保护研究所,南京 210014;
省部共建国家重点实验室培育基地—江苏省食品质量安全重点实验室,南京 210014;
江苏丘陵地区镇江农业科学研究所,句容 212400
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31401728);江苏省自主创新项目(cxz(17)3023);省部共建国家重点实验室培育基地自主研究课题(4911406)
摘    要:水稻干尖线虫是水稻上重要的寄生线虫,严重危害水稻安全生产。14-3-3蛋白调控生物体的细胞代谢、生长发育和逆境适应等一系列生物过程。本研究通过c DNA末端快速扩增技术(rapid amplification of c DNA ends,RACE)分离获得了一个水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi)14-3-3基因,命名为Ab-14-3-3-a。Ab-14-3-3-a全长c DNA序列含有59 bp的5'非翻译区(UTR)、编码251个氨基酸756 bp的开放阅读框。Ab-14-3-3-a DNA序列包含4个外显子和3个内含子。Ab-14-3-3-a蛋白与其他植物寄生线虫14-3-3蛋白氨基酸序列高度相似,系统发育树显示与植物寄生线虫位于同一进化分支。原位杂交显示Ab-14-3-3-a特异定位于成虫的背食道腺细胞中,表明其在线虫取食和寄生过程中发挥潜在功能。qRT-PCR显示,Ab-14-3-3-a在水稻干尖线虫各个龄期均表达,其中在成虫表达水平最高,而在发育过程中幼虫表达水平最低。当线虫取食不同寄主时,Ab-14-3-3-a的表达水平具有差异性,线虫取食感病水稻早期,Ab-14-3-3-a表达水平上升1.5倍,而取食灰葡萄孢(Botrytis cinerea)时Ab-14-3-3-a表达可提高数百倍。利用体外RNA干扰技术将Ab-14-3-3-a的表达进行有效抑制,结果显著影响了线虫的产卵、成虫发育以及线虫种群数量。综上,Ab-14-3-3-a参与调控水稻干尖线虫的取食行为和发育进程。本研究相关结果有助于拓展植物寄生线虫14-3-3蛋白功能,为深入研究线虫与植物互作机制提供了理论依据。

关 键 词:水稻干尖线虫    14-3-3蛋白    基因克隆    RNA干扰  

Characterization of a 14-3-3 gene from the white tip nematode Aphelenchoides besseyi
WEI Li-hui,FENG Hui,ZHANG Jin-feng,CHEN Xi,YANG Hong-fu,YAO Ke-bing.Characterization of a 14-3-3 gene from the white tip nematode Aphelenchoides besseyi[J].Acta Phytopathologica Sinica,2018,48(4):527-536.
Authors:WEI Li-hui  FENG Hui  ZHANG Jin-feng  CHEN Xi  YANG Hong-fu  YAO Ke-bing
Institution:College of Plant Protection, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China
Institute of Plant Protection, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China
Key Lab of Food Quality and Safety of Jiangsu Province—State Key Laboratory Bree-ding Base, Nanjing 210014, China
Zhenjiang Institute of Agricultural Sciences in Jiangsu Hilly Area, Jurong 212400, China
Abstract:
Keywords:Aphelenchodies besseyi  14-3-3 protein  gene cloning  RNA interference  
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