| 猪细小病毒6型SYBR Green I real-time PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 孙文超,刘立明,赵翠青,汪伟,赵冠宇,曹亮,张赫,庄忻雨,韩继成,鲁会军,金宁一.猪细小病毒6型SYBR Green I real-time PCR检测方法的建立[J].中国兽医学报,2018(3). |
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| 作者姓名： | 孙文超 刘立明 赵翠青 汪伟 赵冠宇 曹亮 张赫 庄忻雨 韩继成 鲁会军 金宁一 |
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| 作者单位： | 温州大学病毒学研究所;军事医学科学院军事兽医研究所;吉林大学动物医学学院;吉林农业大学动物科技学院; |
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| 摘 要： | 采用PCR方法扩增PPV6保守区域基因252bp,将其克隆到pClon007载体,构建重组质粒作为标准阳性质粒。以质粒模板建立PPV6的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法,并进行敏感性、特异性和重复性等验证。结果表明,重组质粒特异性好;建立的real-time PCR方法Ct值与标准品模板在8.80×109~8.80×101 copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.993,斜率为-4.320。该方法检测灵敏度可达8.80×101 copies/μL。该方法对JEV、PRV、PRRSV、PCV2、FMDV等猪常见病原检测均无特异性扩增;对临床样品的检测结果表明,所建立的荧光定量PCR阳性检测率为40.63%。本试验成功建立了PPV6SYBR Green I real-time PCR检测方法,可实现对PPV6快速灵敏的诊断。
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| 关 键 词： | 猪细小病毒6型 SYBR Green I 荧光定量PCR |
Development of a SYBR GreenⅠreal-time PCR method for detection of PPV6 |
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