| 禽腺病毒4型hexon基因克隆与原核表达分析 |
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| 引用本文： | 王许航,王林,经美,陈萍,王金凤,孙继国,刘聚祥,王建昌,袁万哲.禽腺病毒4型hexon基因克隆与原核表达分析[J].中国兽医杂志,2018(7). |
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| 作者姓名： | 王许航 王林 经美 陈萍 王金凤 孙继国 刘聚祥 王建昌 袁万哲 |
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| 作者单位： | 河北农业大学动物医学院;北京市动物疫病预防控制中心;河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心;河北省兽医生物技术工程技术研究中心 |
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| 摘 要： | 应用PCR方法扩增禽腺病毒4型(Fowl adenovirus 4,FAd V-4) Hexon基因,将其克隆至原核表达载体p QE1中,获得重组质粒p QE1-hexon。将重组质粒经诱导表达后,通过SDS-PAGE对表达产物进行分析。结果,Hexon蛋白在25℃经诱导4 h、IPTG浓度为0. 8 mmol/L时可获得最大诱导表达量,表达蛋白的相对分子质量约为107 k D,主要以不溶性包涵体形式存在。纯化复性后,可得到浓度为5. 165 mg/m L及纯度为97%的Hexon蛋白。本研究获得的重组菌p QE1-hexon以及高纯度的Hexon蛋白,为进一步研究FAd V-4检测方法和新型疫苗奠定了基础。
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