| 猪弓形虫感染免疫胶体金试纸条的制备与初步应用 |
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| 引用本文： | 寇金华,杨正涛,刘维建,高珺珊,李建华,杨举,张西臣,宫鹏涛.猪弓形虫感染免疫胶体金试纸条的制备与初步应用[J].中国兽医学报,2018(1):82-87. |
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| 作者姓名： | 寇金华 杨正涛 刘维建 高珺珊 李建华 杨举 张西臣 宫鹏涛 |
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| 作者单位： | 吉林大学动物医学学院; |
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| 摘 要： | 制备1种检测猪弓形虫血清循环抗原的免疫胶体金试纸条。利用柠檬酸三钠还原法制备40nm的胶体金溶液,标记抗弓形虫表面抗原SAG3(surface antigen 3,SAG3)单克隆抗体(Anti-A-SAG3-7),用另1株抗弓形虫表面抗原SAG3单克隆抗体(Anti-A-SAG3-23)与羊抗小鼠IgG抗体分别包被于硝酸纤维素膜(NC膜)上的检测线和质控线,制备并优化免疫胶体金试纸条检测条件。胶体金溶液的最适pH值为加入4μL 0.2 mol/L K2CO3时的pH值。Anti-A-SAG3-7的最适标记量为12μg。最佳NC膜为Millipore 135。T、C线抗体最佳包被质量浓度均为0.25g/L,T、C线抗体最佳包被体积均为8μL。试纸条的灵敏度达1∶160,与猪囊虫阳性血清无交叉反应。稳定性试验表明,该试纸条置于室温至少可保存1个月有效,置于4℃可保存3个月有效。对广东某地区、吉林某地区猪场的各94份猪待检血清进行检测,分别有17,10份为阳性血清,样品阳性率为18.08%,10.63%。本研究制备的胶体金试纸条具有操作简单,敏感特异等优点,适合临床基层单位对猪弓形虫病的早期诊断及流行病学调查。
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| 关 键 词： | 刚地弓形虫 SAG3 循环抗原 胶体金 |
Development and preliminary application of colloidal gold immunochromatographic strip for the detection of Toxoplasma infection in swine |
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